AISLAMIENTO Y CULTIVO DE MICROORGANISMOS.

AISLAMIENTO Y CULTIVO DE MICROORGANISMOS

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Aislar microorganismos provenientes del mosto de uva  por medio de técnicas de sembrado de versación y extensión para su posterior confirmación mediante microscopia.

OBJETIVO ESPECIFICOS

Preparar un medio de cultivo en cajas petrie usando solución de agar en tubos de ensayo, tapando los mismos e inclinándolos para su solidificación.

Realizar un sembrado por extensión en una caja petrie usando agar solidificado y una dilución para luego expandir con Asa Drigalsky.

Realizar un sembrado por versación en una caja petrie mediante la superposición de agar malta a una dilución previamente colocada para su posterior solidificación

Identificar y seleccionar las colonias de levaduras, observar su crecimiento y características de la misma (coloración, morfología , etc).

Calcular las unidades formadoras de colonias presentes en la caja petrie mediante  el conteo de colonias de levaduras

Aislar las colonias de posibles levaduras con un asa de aguja y sembrar por estria en el agar solidificado en pico de flauta

Observar e identificar las levaduras  por medio del microscopio .

MATERIALES, EQUIPO Y REACTIVOS

Materiales

Fruta (durazno, uva, frutilla, otros)

Dos cajas petrie

Matraz erlenmeyer de 250 ml

Pipeta graduada

Pera de succion

Tubos de ensayo

Papel madera

Asa de aguja

Asa Drigalsky

Algodón

Mechero de alcohol

Reactivo

Agar agar

Suero ringer

Agar malta

 Equipos

Mufla

Autoclave

Microscopio

METODOLOGIA

1. Preparacion del mosto

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1. Preparacion de los medios de cultivo en cajas petrie

Preparar el agar según la cantidad requerida previo calculo para cajas petrie y tubos de ensayo en un matraz Erlenmeyer de 250 ml

Esterilizar en autoclave todo el material de vidrio a usar : pipetas, tubos de ensayo, cajas petrie todo ello envuelto  en papel madera

       Esterilizar en autoclave la solución de agar

      Vertir 6 ml  de agar en un tubo de ensayo y tapar con un algodón, inclinar para su solidificación

1. Sembrado

Preparar diluciones de mosto virgen en 5 tubos de ensayo que contiene 9 ml de suero Ringer

Extraer 1 ml de mosto virgen (10-1) y transvasar al tubo (10 -2) se mezcla homogéneamente y se extrae 1 ml para después transvasar al 10 -3 y asi sucesivamente.

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