Aislamiento a partir de Streptococcus Faecium

[pic 1]AISLAMIENTO DE Streptococcus Faecium  A PARTIR DE QUESO COSTEÑO

Streptococcus Faecium ISOLATION FROM COASTAL CHEESE

María C Soto, Silvana L Vergara, Vanessa L Díaz.

Estudiantes de IV Semestre de Ingeniería de Alimentos  de la Universidad de Córdoba.

RESUMEN

MATERIALES Y METODOS

MATERIALES

• Materia prima 10 gr (queso costeño)
• Espatura esteril
• Balanza analítica
• Bolsa plástica para agua peptona
• Agua de peptona 90ml
• Mechero
• Agar sangre (dos)
• Asa bacteriológica redonda
• Asa bacteriológica en punta
• Portaobjetos y cubreobjetos
• Microscopio
• Aceite de inmersión
• Baterías para las pruebas bioquímicas respectivas (nitrato, catalasa, mitilidad y H2S, tsi, rojo de metilo y citrato)

REACTIVOS

• Reactivos para tinción de gram: cristal violeta, agua destilada, safranina de gram.
• Peroxido de hidrogeno (para pueba de catalasa).

METODOLOGIA

ETAPA Nº1: OBTENCION DE LA MATERIA PRIMA

La materia prima utilizada fue queso costeño, el cual se obtuvo de la finca LA ESPERANZA, la cual se encuentra ubicada en el municipio de Sahagún Córdoba, el día lunes 02 de noviembre del presente año. (Ver anexos, Figura 1).

ETAPA Nº2: PREPARACION DE LA MUESTRA

Se tomaron 10g de muestra, posteriormente se macero utilizando el mortero. (Ver Anexos, Figura 2).

ETAPA Nº3: PRE-ENRIQUECIMIENTO (SELECTIVO)

Los 10 gr de queso costeño previamente macerado son colocados en una bolsa estéril sellable que contiene los 90 ml de agua peptonada, se agita manualmente, se sella y se lleva a incubar (35º C por  24 horas). (Ver anexos, Figura 3)

ETAPA Nº4: SIEMBRA EN LOS MEDIOS DE CULTIVO

Se tomó un inóculo del caldo pre-enriquecido (agua peptonada y queso costeño), con una asa redonda y se realizó la siembra por método masivo en el agar sangre, Con el fin de llevar a cabo el aislamiento de la bacteria con respecto al medio al ser hemolíticas, el medio se llevó a incubación posteriormente a 35ºC dejando transcurrir 24 horas, se observaron los resultados del crecimiento de la bacteria. (Ver Anexos, Figura 4)

ETAPA Nº5 TINCION DE GRAM

Se realizó la tinción de Gram después de pasadas 24 horas para observar el crecimiento del microorganismo en el medio. Se tomaron muestras de colonias del cultivo de streptococcus faecium, con respecto al crecimiento de la bacteria en cuestión, en efecto, el medio sangre, presento características de crecimiento de colonias β hemolíticas características del crecimiento de streptococcus faecium debido a que es un medio nutritivo para este microorganismo. Posteriormente, siguiendo el procedimiento de este método se realizó el montaje para la tinción diferencial de Gram.

ETAPA Nº6 PRUEBAS BIOQUIMICAS

Se realizaron diversas pruebas bioquímicas, con el fin de identificar la bacteria en cuestión (streptococcus faecium).

• KIA (Medio Kia)
• NITRATO (Medio Caldo Nitrato)
• CATALASA
• MOTILIDAD Y SH2 (Medio SIM)
• ROJO DE METILO (Medio RM-VP)
• CITRATO (Medio Simmons Citrato)

OBSERVACION: Estas pruebas se llevaron a incubación durante un rango de tiempo de 24 a 48 horas a 35ºC.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

CRECIEMIENTO EN EL MEDIO SANGRE

Se observa el crecimiento de colonias en las cajas de Petri, con características propias de bacterias debido a la coloración y hemolisis que estas presentaron. (Ver Anexos, Figura 5)

TINCIÓN DE GRAM

Como se observa en la figura 6, al realizar la tinción de Gram se notó que el microorganismo es de naturaleza Gram positvo y presenta forma de cocos. (Ver Anexos, Figura 6)

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

• KIA (Alc/Ac) y Gas

Al realizar la prueba se obtuvo una fermentación alc/ac; ya que  hubo cambio de coloración en el medio en la parte inferior del tubo, también hubo formación de gas que se reflejó por desprendimiento del medio. Esta prueba proporciono información acerca de la capacidad de la bacteria de atacar un hidrato de carbono específico, incorporado en el medio de crecimiento básico. (Ver Anexos, Figura 7)

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