INFORME DE LABORATORIO N.º 6 “AISLAMIENTO DE STREPTOCOCCUS PYOGENES: HISOPADO FARÍNGEO”

“AÑO DE LA LUCHA CONTRA LA CORRUPCION E IMPUNIDAD”

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

INFORME DE LABORATORIO N.º 6

“AISLAMIENTO DE STREPTOCOCCUS PYOGENES: HISOPADO FARÍNGEO”

DOCENTE:      Blgo°-Mcblgo° César Torres Díaz. M. Sc.

CURSO:          Mecanismos de Agresión y Defensa I

ALUMNO:       Gómez Zavala Jorge

CICLO        :          IV

1. INTRODUCCIÓN

El Streptococcus es responsable de alta morbilidad y mortalidad. El estreptococo beta hemolítico del grupo A es un patógeno bacteriano de importancia médica principalmente por sus secuelas no supurativas; a partir de la década de los ochenta ha habido un incremento en la frecuencia y gravedad de las formas clínicas conocidas, así como el número de casos de enfermedad reumática a nivel mundial. En la actualidad se reconocen aproximadamente 30 especies de Streptococcus; siendo algunas de las especies de mayor importancia en patología humana: S. pyogenes (estreptococo del grupo A), S. agalactiae (estreptococo del grupo B), y S. pneumoniae (neumococo). El S. pyogenes forma parte del grupo A de lancefield, es coco positiva aerobio agente causal más frecuente de faringitis bacteriana.

En este informe describiré todos los pasos realizados en el laboratorio para identificar la presencia de Streptococcus pyogenes.

1. OBJETIVO

• Identificar la presencia de Streptococcus pyogenes y su medio de cultivo.

• Diferenciar la catalasa positiva de la negativa, a través de la prueba de catalasa

• Determinar si la bacteria es Gram-positiva o Gram-negativo a través de la técnica coloración Gram

1. MARCO TEÓRICO

Streptococcus son bacterias gran positivas, no móviles, no forman esporas. Estas con anaerobios facultativos, crecen en medio enriquecido con suero y sangre, su catalasa es negativa. Según la clasificación B-hemolíticos lancefield en grupo A-G, pero los más importante son los del grupo A, B y D.

El S. pyogenes forma parte del grupo A que se encuentra en faringe, recto o vagina.  El requisito primario es la adherencia, ya sea a piel o a la mucosa faríngea; hay interacción entre el ácido lipoteicoico de su pared y la fibronectina de la célula epitelial. Su capsula de ácido hialurónico tiene propiedades antifagocíticas, por su similitud con el ácido hialurónico humano. Entre las proteínas de su pared, la de mayor importancia es la M que además de conferirle resistencia a la fagocitosis, es citotóxica y antigénica.

El agar sangre es medio de cultivo solido enriquecido, diferencial pero no selectivo para el crecimiento de cualquier tipo de bacteria, este medio de cultivo está compuesto por peptonas, aminoácidos, vitaminas, extracto de carne, cloruro, agar, etc. El agar sangre es enriquecido debido a que el agar contiene 5 a 10 % de sangre. Ambos contienen nutrientes que permite el crecimiento de la mayoría de bacterias. No es un medio selectivo porque el crecimiento ocurre sin restricciones y es diferencial porque permite distinguir 3 tipos de bacterias: beta-hemolíticos, alfa-hemolíticos y gamma-hemolíticos.

1. Los beta hemolíticos tienen la capacidad de lisar o romper por completo el glóbulo rojo, formando halo claro alrededor de colonias, por lo tanto, produce hemolisis Beta, por ejemplo, tenemos Streptococcus pyogenes y S. agalactiae.
2. En cambio, el alfa tiene una hemolisis parcial, oxida la hemoglobina transformándola en metahemoglobina, genera un color verdoso alrededor de las colonias, por ejemplo, tenemos S. pnuemoniae y S. viridans.
3. Por último, los gamma-hemolítico que no generan cambio.

En cuanto la sangre puede ser de oveja, cornero o caballo, pero a veces es un poco posible conseguir; por eso en ocasiones se usa sangre humana. Para el uso de la sangre humana hay que tener presente varios factores:

• Si la sangre proviene de individuos que han padecido infecciones bacterianas, estas poseerán anticuerpos específicos. En estas condiciones es probable que se inhiba el crecimiento de algunas bacterias.

• Si la misma se obtiene del banco de sangre, esta contiene citrato y es posible que ciertas bacterias no se desarrollen en su presencia. Por otra parte, si la sangre proviene de pacientes que están tomando antibióticos, puede inhibirse el crecimiento de bacterias susceptibles.

• si la sangre es de una persona diabética, el exceso de glucosa interfiere en que se desarrollen adecuadamente los patrones de hemólisis.

1. MATERIAL Y EQUIPOS

• Hisopo de madera
• Agar sangre (enriquecido-no selectivo)
• Baja lenguas
• Placas Petri (4 divisiones, 3 divisiones, pequeñas, grandes)
• Mechero bunsen
• Incubadora
• Porta objetos
• Agua oxigenada
• Lugol
• Safranina
• Alcohol acetona
• Cristal violeta
• Pipeta
• Pisetas
• Lejía

Otros

• Energía eléctrica
• Gas
• Fósforos
• Agua
• Tina
• Maderas
• Balde

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1. PROCEMIENTO

Dia 16-09-2019

El hisopado faríngeo: para realizar esta técnica debemos de tener baja lenguas esterilizado, hisopos de madera esterilizados y el medio de cultivo. También hay tener puesto lo elementos de bioseguridad como guantes y cubre bocas.

1. En primer lugar, la persona a la que le vas a realizar el hisopado faríngeo, debe de estar cómodamente sentado.
2. Hacer que tu compañero abre la boca, coloca el baja lenguas para sostener la lengua.
3. Introduce el hisopo hasta el fondo hasta llegar a la pared faríngea, si chocar las paredes de la boca. Sacar la muestra e inocular en el agar sangre.
4. Al terminar de inocular debemos de poner a la flama el baja lengua e hisopo usado para evitar contaminar.
5. Al terminar de sembrar el inoculo de la muestra aeróbica. Colocamos el cultivo a la incubadora entre 18 h 24 h.

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