Aprender a realizar una buena tipificación sanguínea para determinar el grupo sanguíneo ABO y Rh

Objetivo

Aprender a realizar una buena tipificación sanguínea para determinar el grupo sanguíneo ABO y Rh

Justificación

La realización de una tipificación sanguínea que tiene como fin saber el grupo ABO al que pertenece la persona y además la presencia del factor Rh, esto tiene una gran importancia en las transfusiones sanguíneas ya que esta nos ayuda a detectar la presencia de antígenos adheridos a la membrana eritrocitaria y prevenir una posible reacción antígeno-anticuerpo con la sangre del receptor al momento de una donación sanguínea  que puede ser mortal, por esto es tan importante conocer el grupo sanguíneo de cada uno y qué tipo de sangre puede uno recibir para evitar esta complicación.

Se divide en 2 pruebas, la directa y la inversa. Para la prueba inversa se utiliza el plasma y sangre conocida, en esta prueba el resultado será el contario, por ejemplo, si aglutina en la “B”, significa que el plasma del donante contiene anti-B y por ende su grupo sanguíneo es “A”.

Mientras que en la prueba directa se utiliza anticuerpos dirigidos contra cierto grupo sanguíneo denominados Anti-A, Anti-B y Anti-AB, si aglutina en el “A” el grupo del donante es “A”

Fundamento

Sistema ABO

 El sistema ABO fue descubierto por Karl Landsteiner en 1901, y fue el primer sistema de grupo sanguíneo conocido; su nombre proviene de los tres tipos de grupos que se identifican: los de antígeno A, de antígeno B, y O sin antígenos. O sea que en la membrana del eritrocito podemos encontrar antígenos A, B o la ausencia de estos, teniendo 3 grupos diferentes y un cuarto grupo con la presencia de antígenos A y B. Cada antígeno presente en la membrana del eritrocito tiene un anticuerpo contra el grupo contario en el plasma quedando como se explica en la siguiente imagen:

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La determinación de los grupos sanguíneos tiene importancia en varias especialidades y disciplinas:

•En hemoterapia; se vuelve necesario estudiar al menos alguno de estos sistemas en cada individuo para garantizar el éxito de las transfusiones. Así, antes de toda transfusión, es necesario determinar, al menos el tipo AB0 y Rh del donador y del receptor.

 •En ginecología/obstetricia; se puede diagnosticar la enfermedad hemolítica del recién nacido a través de su estudio, adoptándose medidas preventivas y curativas.

•En antropología; se pueden estudiar diversas poblaciones y sus interrelaciones evolutivas, a través del análisis de la distribución poblacional de los diversos antígenos, determinando su predominancia en cada etnia y haciéndose comparaciones.

Factor Rh

El factor RH, cuyo nombre científico es Rhesus, representa a una proteína especifica que se encuentra en los glóbulos rojos de la sangre. Su presencia, nos hace Rh Positivos y su ausencia Negativos, acompañando así nuestra clasificación sanguínea.

Su nombre se debe a cómo fue descubierto. El factor Rh se refiere a los macacos Rhesus, que suelen ser utilizados para investigación sanguínea, gracias a su similitud fisiológica con los humanos y fue justamente, en su sangre que se descubrió la existencia del factor Rh y, contrastándola con la de los humanos, se comprobó que este también puede estar presente en nuestra sangre.

 La sangre de los Rh+ transfundida a los Rh-, provoca en el suero de éstos últimos la formación de anticuerpos aunque en el caso de ser la primera vez que se entra en contacto con el factor Rh la reacción es retardada pero en transfusiones posteriores de sangre Rh positiva a la misma persona, que ya está inmunizada frente al factor Rh, la reacción transfusional aumenta más y puede ser inmediata y tan grave como una reacción transfusional causada por un mal emparejamiento de la sangre respecto a los tipos A o B destruyendo los glóbulos rojos del donante Rh +, invalidando la transfusión y creando efectos adversos. También en el embarazo un feto Rh + puede provocar en la madre Rh - la producción de aglutininas que podrá ser la causa de la enfermedad hemolítica de los recién nacidos.

Determinación genética del sistema ABO y factor Rh

El A, B u O se heredan de la madre y del padre, al igual que el factor Rh. En el caso del grupo ABO, el grupo A y B son los dominantes y el O es el recesivo, quedando de la siguiente manera.

En el caso de factor Rh, el Rh+ es el domínate y el recesivo es el Rh-, quedando de la siguiente manera

Material y Método

• Tubo vacutainer tapa morada
• Equipo vacutainer
• Pipeta Pasteur
• 6 tubos de ensayo rotulados para la prueba directa (A, B, AB, D, TRh, AT)
• 4 tubos rotulados para la prueba inversa (A1, A2, B, O)
• 2 tubos de ensayo
• Anti-A, Anti- B, Anti-AB, Anti-D (para él Rh), Anti-A1, Anti-H y Testigo Rh

Método

1. Realizar la punción venosa y la muestra recolectada centrifugarla a 3500 rpm durante 5 min
2. En un tubo de ensayo colocar el plasma y en otro tubo de ensayo color colocar de 3-5 gotas

Prueba directa

El tubo con eritrocitos será utilizado para la prueba directa.

1. Colocar solución salina fisiológica hasta tener eritrocitos color agua de sandía.
2. Centrifugar a 1500 rpm durante 1 minuto y luego decantar, se realizará este paso 3 veces.
3. Colocar 1 gota de eritrocitos lavados en los 6 tubos rotulados para la prueba directa.
4. Colocar Anti-A en el tubo rotulado del grupo A, una gota de Anti-B al tubo B, una gota del Anti-AB al tubo AB, una gota de Anti-D al tubo D, una gota del testigo Rh al tubo TRh.
5. Centrifugar a 1000 rpm durante un minuto
6. Tomar cada tubo y agitarlo suavemente para observar la aglutinación
7. Reportar positivo si se observa aglutinación o negativo si no se observa (Los positivos con cruces o grumos).

• 4+ → Botón compacto (Sobrenadante limpio, sin desprendimientos)
• 3+ → Botón compacto, pero con algunos desprendimientos
• 2+ → Botón algo compacto con notables desprendimientos
• 1+ → Sin botón, desprendimientos
• Grumos → Se observan grumos

1. En el caso de que la tipificación salga positiva en “A”, se realizara la tipificación para A1 o A2, colocando una gota de eritrocitos lavados y su respectivo antígeno, Anti-A1 para el A1 y Anti-H para el A2.

Prueba inversa

1. Se coloca una gota de eritrocitos conocidos y 2 de plasma
2. Se centrifuga a 1000 rpm durante un minuto
3. Se observa aglutinación

Nota: El Auto Testigo (AT) se ponen 2 gotas del plasma y una de eritrocitos provenientes de la misma persona y tiene que dar negativo. Esto nos funciona para comprobar resultados

Resultados

Itzasunelly Alejandra Ledesma Moreno

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Ariel Eduardo Valdivia Villalobos

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Lizeth Estefanía Gutiérrez Loza

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Interpretación de resultados

Itzasunelly Alejandra Ledesma Moreno

Prueba Directa

Prueba Inversa

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