CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF) Y MACERACION DEL PIMENTON (CAPSICUM ANNUUM)

CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA (CCF) Y MACERACION DEL PIMENTON (CAPSICUM ANNUUM)

Bryam Smith Molina & junior

Estudiantes de la Universidad de la Amazonia, Programa de Química, Faculta de Ciencias Básicas, Docente encargado Brian Alejandro Castro Agudelo, Laboratorio de Orgánica I, Florencia (Caquetá), Colombia.

Practica realizada el día 03 de junio del 2017

OBJETIVOS

• Aplicar la cromatografía para identificar los diversos componentes de una mezcla basándose en el coeficiente de reparto de cada uno. 
• Identificar los diferentes pigmentos presentes en el pimentón (los extractos fueron obtenidos por maceración)
• Comprender la técnica de extracción solido -liquido de un compuesto orgánico “pimentón”
• Sistematizar un análisis crítico de que se extrajo durante la extracción teniendo en cuenta polaridades
• Asimilar la importancia de volatilizar la humedad del analito para realizar la respectiva maceración.

INTRODUCCIÓN

Cromatografía Capa Fina.

En la siguiente practica se realizó, la técnica de cromatografía de capa fina, en el pimentón utilizando extractos obtenidos de la técnica de maceración, para determinar que compuestos estructuran dicho fruto que contiene diversas especies, como dato curioso, dicho fruto es familiar del ají pero carece de cierto sabor picante característico, también es  conocido por diversos nombres en distintos países como morrón en España, locote en Paraguay, pimiento en México y pimentón en Colombia.

   La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-líquido y gases-liquido (fase vapor). Todas las técnicas de cromatografía dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido. [1]

Todos los sólidos finamente pulverizados tienen el poder de absorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente' todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía. [1]

Adsorbentes Y Eluyentes.

Los dos adsorbentes (fase estacionaria) más ampliamente utilizados son la gel de sílice (SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar. La alúmina anhidra es el más activo de los dos, es decir, es el que retiene con más fuerza a los compuestos; por ello se utiliza para separar compuestos relativamente apolares (hidrocarburos, haluros de alquilo, éteres, aldehídos y cetonas). El gel de sílice, por el contrario, se utiliza para separar sustancias más polares (alcoholes, aminas, ácidos carboxílicos). El proceso de adsorción se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo‐dipolo o enlaces de hidrógeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de descomposición. El adsorbente interacciona con las sustancias mediante interacción dipolo‐dipolo o mediante enlace de hidrógeno si lo presentan. [3]

Determinación RF.

La relación entre las distancias recorridas por incompuesto dado y el frente de la fase móvil, desde el origen del cromatograma se conoce como Rf (rate factor), y tiene un valor constante para cada sustancia en unas condiciones cromatografías dadas (temperatura, composición de fase móvil, tamaño de la cubeta...etc.). El cálculo del Rf se realiza según:

[pic 3]

Para comparar dos muestras se suelen eluir al mismo tiempo en el mismo cromatograma. Las figuras siguientes ilustran tanto este concepto del Rf como los resultados que se consiguen en función del eluyente elegido.

[pic 4][pic 5]

[pic 6][pic 7]

[pic 8][pic 9]

Factores Que Influyen En Una Separación Por Cromatografía De Capa Fina.

a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la fase estacionaria.[2]

b) La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire. [2]

c) Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y después dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. [2]

d) Pureza de los disolventes. [2]

EXTRACCION SOLIDO-LIQUIDO

REVELADO DE PLACAS.

Revelado de las placas La mayor parte de las placas de cromatografía llevan un indicador fluorescente que permite la visualización de los compuestos activos a la luz ultravioleta (254 nm). El indicador absorbe la luz UV y emite luz visible. La presencia de un compuesto activo en el UV evita que el indicador absorba la luz en la zona en la que se encuentra el producto, y el resultado es la visualización de una mancha en la placa que indica la presencia de un compuesto. En el caso de compuestos que no absorben luz UV, la visualización (o revelado) del cromatograma requiere utilizar un agente revelador. Este tiene que reaccionar con los productos adsorbidos proporcionando compuestos coloreados. [3]

RESULTADOS

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