Coloraciones

• En términos de microbiología. Que es una coloración o tinción?

R/técnica utilizada en microscopía para distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.

La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina.

• Cuál es la utilidad de los colorantes en microbiología?

R/El tamaño de la mayoría de las células bacterianas es tal que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico por lo que se hace necesario la utilidad de colorantes para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas dentro de células individuales.

• Investigar el fundamento, utilidad y procedimiento de las coloraciones de Gram, Ziehl Neelsen, Tinta china, coloraciones para esporas.

Gram

Fundamento: se basa en la capacidad de la pared celular de algunas bacterias de retener o no el colorante primario luego de la decoloración con alcohol acético.

Utilidad: diferenciar a las bacterias en dos tipos por su parte celular en Gram negativas y Gram positivas.

Procedimiento: fijación, colorante principal (cristal violeta), mordiente (lugol), decolorante (alcohol acetona), colorante de contraste (safranina)

Ziehl Neelsen

Fundamento: se basa en la capacidad que poseen algunas bacterias de resistir a decoloración con alcohol acido.

Utilidad: identificar las bacterias acido alcohol resistentes.

Procedimiento: desparafinar e hidratar los cortes, ácido periódico 5% por 10 min, lavar con agua destilada, fucsina fenicada por 15 min, decolorar en alcohol ácido al 50%,lavar con agua destilada, hematoxilina por 10 min, azulidificar con azul de metileno, Deshidratar, aclarar y montar preparaciones.

Tinta china

Fundamento: se basa en la capacidad que tienen algunas bacterias de producir capsulas.

Utilidad: visualizar esporas como entes refrigerantes sobre un campo oscuro.

Procedimiento: se emplea nigrosina o tinta china.

Coloraciones para esporas

Fundamento: se basa en la capacidad que poseen algunas bacterias de producir mecanismo de resistencia llamado esporas.

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