Control de calidad en enzimología

Control de calidad en enzimología

¿Qué es el Método Q-10 para la elaboración de determinaciones de analitos en el laboratorio?

Es un parámetro comúnmente usado el coeficiente de temperatura Q10 definido como la tasa de cambio en la actividad microbiana entre T1 y T2 = T1 + 10oC.

El coeficiente de temperatura Q10 es el factor mediante el cual la velocidad de una reacción (como una reacción química) aumenta con un incremento de 10° en la temperatura, medida en grados Celsius. Q10 se define mediante la ecuación Q10 = (R2/R1) **[10/(T2-T1)], donde el doble asterisco denota la función exponencial y Rn = velocidad de reacción a temperatura Tn. Si mides la velocidad de la reacción a dos temperaturas cualquiera, puedes ingresar las velocidades y las temperaturas en esta ecuación para hallar el valor de Q10

Instrucciones

1.Mide las velocidades de una reacción a dos temperaturas. Llama a las velocidades R1 a temperatura T1 y R2 a temperatura T2. Anota el valor de R1, R2, T1 y T2 en un papel. Esto te ayudará a evitar confusiones.

 2. Calcula R2/R1 y escribe tu respuesta. Por ejemplo, si R1 = 8 y R2 = 24, calcula 24/8 = 3.

3. Calcula T2 - T1 y escribe tu respuesta. En el ejemplo, dice T1 = 40 grados Celsius y T2 =70 grados Celsius. Entonces T2 - T1 = 70 - 40 = 30.

4. Divide 10 por tu respuesta en el paso 3. En el ejemplo, tu cálculo 10/30 = 0,333. Anótalo.

5. Eleva R2/R1 a la potencia 10/(T2-T1). Has determinado R2/R1 en al Paso 2 y calculado10/(T2-T1) en el Paso 4. En el ejemplo, elevas 3 a la potencia 0,333. Realiza este cálculo con la calculadora científica (ver Recursos) ingresa "3", presiona la tecla "y a la x" (la primera tecla de la tercera fila), ingresa ".333" y presiona la tecla "=". La respuesta es1,44. Este es el valor de Q10.

NOTA: Debes usar temperaturas en grados Celsius para calcular Q10. Puedes convertir una temperatura F (en grados Fahrenheit) a temperatura C (en grados Celsius) con la ecuación C= F (F-32) x (5/9). Por ejemplo, si F = 212, entonces C = (212-32) x (5/9) = 180 x (5/9) = 100.

La temperatura puede acelerar el proceso de determinaciones, así como también acelerar las reacciones enzimáticas.

En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general.

Sin embargo, al ser proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor.

La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima.

Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de actividad catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la actividad enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

[pic 1]

Todas las enzimas trabajan en un rango de temperaturas específicas del organismo al que pertenecen.

Los aumentos de temperatura generalmente provocan un incremento de la velocidad de reacción. Esto se debe a alteraciones de la estructura de la proteína debidas a la interrupción de uniones iónicas que resultan en la estabilización de la estructura tridimensional de la enzima.

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