Coprocultivo

INTRODUCCIÓN

Se denomina coprocultivo a la siembra de una muestra adecuada de heces en medios de cultivo apropiados para el desarrollo de bacterias entéricas patógenas. Muestra adecuada es aquella que ha sido recolectada durante el periodo agudo de la enfermedad, cuando es más fácil comprobar presencia de pus, moco o sangre, y antes de la administración de antimicrobianos.

Para realizar el examen se emplean heces que no tengan más de media hora de obtenidas, o muestras tomadas directamente del recto con un hisopo de algodón. Cuando las siembras no se pueden efectuar de inmediato o la muestra demora en llegar al laboratorio, se aconseja emulsionar aproximadamente 1g de heces en 1º ml de un líquido conservador, o bien, depositar en éste el hisopo rectal.

Finalidad

Es indicado para el diagnóstico de ciertas infecciones del aparato gastrointestinal, especialmente aquellas infecciones provocadas por bacterias. Se utiliza para estudiar casos de diarrea severa, persistente o recurrente sin causas conocidas, y en caso de diarreas asociadas al consumo de antibióticos.

Toma de muestras

La materia fecal para coprocultivo debe estar libre de contaminantes como orina o papel higiénico. Se puede obtener la muestra recogiendo las heces en una bolsa plástica adosada a la taza del inodoro o utilizando equipos de recolección comerciales. En caso de bebés, se puede adosar la bolsa al pañal. Una vez obtenida la muestra se debe colocar en un recipiente estéril y derivarla al laboratorio lo más rápido posible.

Técnica de laboratorio

Se realiza una siembra de heces sobre una caja de Petri que contiene un medio de crecimiento. Se vigila el crecimiento, y en caso de existir microorganismos se les identifica mediante microscopía o empleo de tinciones específicas.

Medios de cultivo

Para facilitar el aislamiento de bacterias entéricas patógenas se utilizan medios de enriquecimiento y medios selectivos.

Los más empleados son los siguientes:

Medios de enriquecimiento

Caldo con tetrationato (Mueller y Kauffmann). Este método posee la propiedad de inhibir o destruir el crecimiento de Salmonella y Shigella.

Caldo con selenito (Leifson). Posee selenito, ácido de sodio que inhibe el rápido desarrollo de salmonelas y shigellas.

2. Medios selectivos

Agar SS (salmonella-shigella). Este medio selectivo, empleado para aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena inhibición sobre agentes coliformes, sin limitar el desarrollo de los patógenos gramnegativos.

Agar MacConkey. Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares, las cuales inhiben la flora grampositiva. Salmonella y Shigella sp. forman colonias incoloras.

Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato). Medio indefinido, mixto, sólido y diferencial. En él crecerán microorganismos quimioheterótrofos

TECNICA

MATERIAL

Agua destilada

Gradilla

Tubos de ensayo

Asa de siembra desechable y normales

Hisopo

Papel de filtro

Pipetas de vidrio

Medios de cultivo

Pinzas metálicas

Alcohol

Algodón graso

Vaso de precipitado

Mechero Bunsen

Portaobjetos

Cubreobjetos

Microscopio

Cubeta de tinción

Pinzas de madera

Frasco lavador

3.2 Reactivos:

Medios de cultivo para aislamiento:

– agar sangre

– agar Mc Conkey

– Agar entérico Hektoen (HK)

Medios para pruebas bioquímicas:

- Agar Christensen

- KIA

Colorantes para tincion de Gram: lugol, cristal violeta, fucsina básica, alcohol

Lugol o Negro sudán

3.3 Muestras:

Muestra: heces de adulto.

Recogida de la muestra

Preparación o indicaciones del paciente:

Se debe seguir con el régimen habitual de comidas.

a. para niños/as

Para bebés y niños pequeños que usan pañales:

Se puede cubrir el pañal con un envoltorio plástico. Si se coloca correctamente el envoltorio plástico, separando las heces de la orina, se puede evitar que éstas se mezclen con el fin de obtener una muestra mejor.

. b. para adultos

Hay muchas maneras de recolectar las muestras. Se pueden recoger las heces

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