Cromatografia Y Serie Eluotropica

Cromatografía en columna:

Se emplea para la separación de mezclas o purificación de sustancias a escala preparativa. Como faseestacionaria se usa, generalmente, gel de sílice o alúmina dentro de una columna. La elección deldisolvente es crucial para una buena separación. Dicho disolvente pasa a través de la columna por efectode la gravedad o bien por aplicación de presión (cromatografía flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de ésta un poco de algodón o lanade vidrio, para evitar que la sílice o la alúmina queden retenidas en la columna y que el disolvente seengrasada hasta el nivel del soporte. A continuación se introduce la muestra por la parte superior de la columna y se e luye con el disolvente elegido, recogiéndose por lo general en tubos de ensayo.

Una columna de cromatografía es un tubo de vidrio relleno con una sustancia sólida de propiedades adsorbentes constituida por pequeñas partículas: gel de sílice y alúmina son las más usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografía como la fase estacionaria. A través de la columna se hará pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyentey/o fase móvil.

La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequeña cantidad de disolvente y se coloca sobreel adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo. A continuación sepasa un flujo de eluyente a través de la columna. Los compuestos constituyentes de la mezcla sonarrastrados por el eluyente a su paso, haciéndoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo,notodos los compuestos avanzan a la misma velocidad, y esta es precisamente la clave de la cromatografía.Algunos compuestos se ven más fuertemente retenidos por el adsorbente (fase estacionaria) y por lotanto avanzarán más despacio. Por el contrario, otros apenas son retenidos y avanzarán a mayor velocidad.

En general se dice que la separación en la cromatografía se basa en la afinidad diferencial de los distintoscompuestos por la fase móvil o la fase estacionaria.

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