Cromatografía de Adsorción: Aplicación a la separación de compuestos orgánicos

Universidad Nacional de Asunción

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Departamento de Química

Carrera de Biotecnología

Cromatografía de Adsorción: Aplicación a la separación de compuestos orgánicos*

Joel Alberto Ortiz Monjagata**

San Lorenzo, 2016

*Trabajo Práctico N°5 presentado a la Catedra de Química Orgánica.

**Alumno del segundo semestre de la Carrera de Biotecnología, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Asunción.

Objetivos

1. Comprender el proceso de la cromatografía.
2. Diferenciar entre fase móvil y fase estacionaria.
3. Adquirir manualidad en la ejecución de los diferentes tipos de cromatografía

Introducción

        Este trabajo estudia la aplicación de la cromatografía a compuestos orgánicos como método de separación basado en la distribución  selectiva de compuestos diferentes entro dos fases inmiscibles. Los componentes que se han de separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales está en reposo (fase estacionaria) mientras que la otra (fase móvil) se mueve en una dirección definida. La técnica cromatográfica es muy útil en una variedad de campos incluyendo ciencias puras, aplicadas, medicina forense, entre otros. El proceso se basa en el hecho de que diferentes moléculas se comportan de manera diferente cuando se disuelven con un solvente y se mueven a través de un medio. Rf es el factor de retardo o retraso, que mide la movilidad relativa de cada componente con respecto al máximo posible, la distancia recorrida por el frente de fase móvil.

Específicamente, en esta práctica se realiza la cromatografía de adsorción, la cual se basa en la diferente afinidad de adsorción de los componentes de la muestra sobre la superficie de un sólido activo. La adsorción es la capacidad de las superficies para fijar moléculas. La fase estacionaria es siempre sólida.

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Materiales y Reactivos

• Etanol
• Azul de Metileno
• Fluoresceína
• Metanol
• 2 vasos de precipitado
• 1 soporte papel
• 1 soporte aluminio
• 2 vidrios reloj

Metodología

1. Se preparó una muestra mezclando azul de metileno y fluoresceína en proporción 1:1.
2. Se marcó el punto de aplicación de las muestras (línea de siembra) en el soporte papel y el soporte aluminio.
3. Se cargó un vaso de precipitado con 10 mL de Metanol y otro vaso de precipitado con 10 mL de Etanol y se los cubrió con un vidrio reloj a cada uno.
4. Se aplicaron las muestras de azul de metileno, la mezcla y fluoresceína en el punto de inicio de ambos soportes.
5. Se introdujo el soporte papel en el vaso de precipitado con Metanol y el soporte aluminio en el vaso precipitado con Etanol, se anotaron los resultados.

Resultados

Soporte papel y metanol:

• Azul de metileno: 4cm
• Mezcla: 5cm
• Fluoresceína: 5cm
• Solvente: 5cm

Rf azul de metileno = 4/5 =0,8

Rf fluoresceína = 5/5 = 1

Soporte aluminio y etanol:

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