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Curva tipo para azucares reductores


Enviado por   •  24 de Septiembre de 2019  •  Práctica o problema  •  810 Palabras (4 Páginas)  •  173 Visitas

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INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL[pic 1][pic 2]

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS

INGENIERIA EN SISTEMAS AMBIENTALES

PRÁCTICA 2. CURVA TIPO DE AZUCARES REDUCTORES.

U. de A. Bioquímica Fundamental

Integrantes:

Clorio Pérez Salvador

Lozano Guillen Jesús Daniel

Sección 3.

Equipo:1

Grupo: 4AV1.

“La técnica al servicio de la patria”

INTRODUCCIÓN

Una curva de tipo es la representación es un plano, donde la imagen de la función estará dada por una regla de correspondencia que modela un conjunto de datos de concentración de un analito y los asocia en el rango de la función. Para construir esta regla de correspondencia hay que seleccionar un modelo para estimar los parámetros que permiten determinar la linealidad de esa curva (o imagen de la función) y, en consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener resultados que sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el procedimiento se comparan propiedades físicas o químicas del analito con la de estándares de concentración conocida del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy similares a este). Para realizar la comparación se requiere utilizar métodos y equipos apropiados para la resolución del problema de acuerdo al analito que se desee determinar.

La etapa de calibración analítica se realiza mediante un modelo de línea recta que consiste en encontrar la recta de calibrado que mejor ajuste a una serie de n  puntos experimentales donde cada punto se encuentra definido por una variable independiente (generalmente concentración del analito de interés) y una variable dependiente (generalmente respuesta instrumental). La recta de calibrado se encuentra definida por una ordenada al origen (b) y una pendiente (m), mediante la ecuación de una recta (y=mx +b)

Por otro lado, cuando reacciona el 3,5 DNS con las D-glucosa se forma D-Gluconato y sales de salicilato que son de color rojo y su máximo de absorción es de una longitud de onda de 540nm. Entonces, estequiométricamente hablando, si aumentamos el número de moles (concentración) en la reacción entonces la concentración de sales de salicilatos aumenta, por lo tanto este fenómeno se puede usar para determinar una curva tipo por azúcares reductores, ya que las sales de salicilato tendrán variaciones en la absorción. 

OBJETIVOS

  1. Obtener una curva de calibración de azúcar reductor, mediante la cual se puede transformar las lecturas de absorbancia obtenidas en los experimentos de cinética enzimática, en micromoles de azúcar reductor 

Resultados Experimentales

Tubo

1

2

3

4

5

Absorbancia 入= 540 nm

0.099

0.144

0.266

0.310

0.510

Azúcar reductor (μmol)

9.9x10^-6

2.88 x 10^-5

1.06x 10^-4

2.48x10^-4

5.1 x10^-4

Tabla 1. Absorbancia obtenida a 540 nm de cinco tubos que contienen azúcares reductores a diferente concentración y la concentración (μmol) de azúcar reductor en los cinco tubos analizados.

Cálculos

Concentración de azúcares reductores

  • Glucosa → 5 μmol = 0.005 M
  • Fructosa → 5 μmol = 0.005 M

[pic 3]

-TUBO 1:

[pic 4]

-TUBO 2:

[pic 5]

-TUBO 3:

[pic 6]

-TUBO 4:

[pic 7]

-TUBO 5:

[pic 8]

CURVA TIPO DE AZÚCAR REDUCTOR

...

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