Determinación de aminoácidos libres por el método espectrofotométrico de ninhidrina

Pamela de Santiago Salido

ID: 00000213274

Determinación de aminoácidos libres por el método espectrofotométrico de ninhidrina.

Isabella Estrada Pérez, Andreína Lizárraga García, Pamela de Santiago Salido*, Kevin David Reynaga Núñez. Instituto Tecnológico de Sonora. Avenida Antonio Caso 2266, Itson, 85137 Ciudad Obregón, Sonora. pamela.desantiago2132374@potros.itson.edu.mx.

Palabras clave: Azúcares reductores, jugo, contenido.

Introducción. El componente básico de las células vivas son las proteínas. Las proteínas están formadas por varias secuencias de aminoácidos, estos son los componentes necesarios en multitud de procesos dentro de las plantas, entre ellos la fotosíntesis, responsable de la producción de los carbohidratos necesarios para el crecimiento de la planta (Payeras, 2016).

El objetivo de esta práctica fue determinar el contenido aminoácidos en alimentos mediante el procedimiento espectrofotométrico de ninhidrina.

Metodología. Como muestra de análisis, se utilizó una solución problema y una bebida energética (Figura 1). Para preparar soluciones, se tomaron 50 ml de etanol al 50% y una solución de glicina para la que se pesó 100 mg de glicina en un matraz volumétrico de 100 y se aforó con agua destilada. Para la cuantificación de aminoácidos totales con ninhidrina, se añadieron 0.4 ml de estándar de glicina en un tubo de ensayo, a ello se le añadió 0.2 ml de reactivo ninhidrina de color y se calentó en baño maría durante 30 min a 100°C (Figura 2), se dejó enfriar y una vez fríos se añadió 3.8 ml de etanol al 50% agitándose en vórtex para mayor homogeneidad (Figura 3), se registró la absorbancia a 570 nm en el espectrofotómetro de marca Shimadzu (Modelo UV-1800). La linealidad se realizó con una curva de calibración de 7 puntos utilizando la solución estándar de glicina 1000 mg/l en un intervalo de concentración de 30-100 mg/l a la que se realizó la reacción de cuantificación de aminoácidos totales, una vez hecho este proceso fue posible determinar el coeficiente de correlación y la ecuación de la recta.

[pic 1]

Figura 1. Muestras de bebidas energéticas.

[pic 2]

Figura 2. Tubos colocados en baño maría.

[pic 3]

Figura 3. Homogenización de los tubos en vórtez.

Resultados y discusión. En la Figura 4 se observó que se obtuvo una R2 de 0.9941. La curva de calibración que se obtuvo nos indica que es un método lineal ya que el coeficiente de determinación (R2) está en el criterio > 0.990 (Hidalgo, 2015).

[pic 4]

Figura 4. Curva de calibración para linealidad.

La Taurina es un aminoácido esencial con acción neuroprotectora, osmoreguladora, antioxidante y modulador del calcio. En las bebidas energéticas se encuentra en una concentración de 600-1000mg (Díaz, et.al., 2015). En los resultados obtenidos a partir de los cálculos con la ecuación de la recta (Tabla 1), es posible observar como resultó un valor menor al que se pide por cada 100 ml, esto puede deberse a errores al momento de manejar la práctica que no hicieron que se formara el complejo violeta que se crea al hacer reacción con la ninhidrina; también esto pudo deberse a que el reactivo estaba preparado incorrectamente.

...