Determinacion De Salmonella En Alimentos

Objetivos:

1. Aplicar adecuadamente la técnica descrita en la Norma Oficial Mexicana para la detección del género Salmonella.

2. Explicar el fundamento de todas las etapas del método de detección de Salmonella en alimentos.

3. Explicar como ayuda la utilización de un método rápido (Tira API 20E) para la identificación del microorganismo encontrado.

Resultados

Cuadro 1: Aislamiento en medios sólidos y diferenciales

Medio utilizado Características del medio sin inocular Resultados después de inocular e incubar Resultados de prueba positiva para Salmonella Observaciones al microscopio Conclusiones

Agar Xilosa Lisina Desoxicolato Color rojo brillante, indicado rojo de fenol Pocas colonias color amarillo brillante. Medio en zona de crecimiento con vire amarillo. Colonias rojas con centro negro

por la producción de ácido sulfhídrico Cultivo descartado Presenta colonias amarillas posiblemente de E.coli ya que puede usar más de un carbohidrato y en este medio se distingue por el color amarillo.

Agar SB Opaco, amarillo pálido, indicador sulfito de bismuto Sin crecimiento y sin cambios de color. Centro de la colonia con precipitado negro y un halo negro grisáceo con brillo metálico. Cultivo descartado No hubo crecimiento

Agar Salmonella Claro, color rosa. Indicador rojo neutro. Colonias rosa intenso con halo de precipitación rosa más claro. Colonias medianas incoloras transparentes con centro negro Cultivo descartado Las bacterias que fermentan la lactosa producen ácido, el cual al reaccionar con el indicador rojo neutro, forman colonias rojas a rosa intenso, esta característica en este medio la presenta E.coli.

Agar entérico Hektoen Color verde-azul oscuro. Indicadores Azul de bromotimol y Fucsina ácida Escaso, colonias grandes, amarillo- naranja con precipitado. vire del medio en zona de crecimiento a amarillo Colonias azul verdosas (puede presentarse pp de H2S)

Bacilos Gram negativos Se tomó de este cultivo por estar las colonias más definidas y al ver al microscopio se observó que estaban puras y era un bacilo Gram negativo para hacer pruebas bioquímicas y averiguar si el microorganismo persistente en casi todos los medios es E.coli.

Agar VB Color rojo claro, Indicador ojo de fenol. Colonias amarillentas, vire del medio en zona de crecimiento a amarillo. Colonias típicas de Salmonella son translúcidas, ligeramente rojas a rosa con halo rojo brillante Cultivo descartado La lactosa y la sacarosa permiten diferenciar la flora acompañante que utiliza estos carbohidratos, del género Salmonella que no los degrada, como E.coli que provoca colonias amarillas en este medio.

Cuadro 2: resultados de pruebas bioquímicas (Páginas agregadas).

Resultados de prueba Tira API 20E:

Cuadro 3: Resultados Api 20E

Prueba Reacción / Enzimas Positivo Negativo Resultado obtenido

ONPG Beta-galactosidasa amarillo sin color Negativo

ADH Arginina deshidrolasa rojo o naranja amarillo Negativo

LDC Lisina descarboxilasa rojo o naranja amarillo Negativo

ODC Ornitina descarboxilasa rojo o naranja amarillo Negativo

CIT Utilización del citrato azul oscuro o turquesa verde Negativo

H2S Producción de H 2 S precipitado negro sin precipitado negro Negativo

URE Ureasa rojo o naranja amarillo Negativo

TDA Triptófano desaminasa marrón-rojo amarillo Negativo

IND Producción de indol color rosa o anillo rosa-rojo amarillo Positivo

VP Producción de acetoína (Voges-Proskauer) rosa-rojo sin color Negativo

GEL Gelatinasa difusión de pigmento sin difusión Negativo

GLU Fermentación/oxidación de glucosa amarillo azul o verde Positivo

MAN Fermentación/oxidación de manitol amarillo azul o verde Positivo

INO Fermentación/oxidación de inositol amarillo azul o verde Negativo

SOR Fermentación/oxidación de sorbitol amarillo azul o verde Positivo

RHA Fermentación/oxidación de ramnosa amarillo azul o verde Positivo

SAC Fermentación/oxidación de sacarosa amarillo azul o verde Negativo

MEL Fermentación/oxidación de melobiosa amarillo azul o verde Positivo

AMY Fermentación/oxidación de amigdalina amarillo azul

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