HIDRÓLISIS ENZIMATICA DE LOS LÍPIDOS DE LA LECHE

UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES U.D.C.A

FACULTAD DE CIENCIA Y TECNOLOGIA

PROGRAMA DE CIENCIAS AMBIENTALES

BIOQUIMICA AMBIENTAL

Ligia Marlene Forero Rey – Docente                                                      

HIDRÓLISIS ENZIMATICA DE LOS LÍPIDOS  DE LA LECHE

OBJETIVOS.

• Analizar el papel de la lipasa y la Bilis en la digestión de los lípidos.
• Desarrollar  habilidades procedimentales para determinar una hidrólisis enzimática en un alimento.

INTRODUCCIÓN

Las lipasas y las esterasas catalizan la hidrólisis de los enlaces ester que se encuentran en un gran número de lípidos saponificables. La reacción que se llevan a cabo es la siguiente:

[pic 1]

Estas enzimas están ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el intestino delgado donde tiene lugar la digestión y la absorción de grasas, debido a que los triacilgliceroles son insolubles en agua, y las enzimas digestivas son solubles en ella. La digestión de los triacilgliceroles transcurre en las interfaces lípido-agua: consecuentemente los agentes emulsificantes tales como las sales biliares producen a menudo una estimulación marcada de la hidrólisis enzimática de los lípidos. En la leche homogenizada, los glóbulos de grasa se encuentran muy finamente divididos y este material sirve como un sustrato excelente para las lipasas.

En este experimento se usa extracto pancreático en el cual se encuentra una esterasa activa y además extracto biliar (contiene ácidos y sales biliares) para comparar su acción en la hidrólisis.

PROCEDIMIENTO:

1. Preparación del Blanco:

En un tubo de ensayo coloque 3 ml de extracto pancreático al 1% caliéntelo hasta ebullición para inactivar la enzima. En un erlermeyer de 100 ml coloque 10 ml de leche homogenizada y agregue los 3 ml de extracto inactivo. Caliente en baño de María a 37 °C durante 15 minutos, al terminar agregue  5 ml de alcohol, 3 gotas de fenolftaleína y titule con KOH al 0.05 M. Guarde el blanco.

1.  Acción de la Enzima sobre los lípidos:

Tome 3 erlermeyer, márquelos y coloque en cada uno 10 ml de leche, agregue a cada uno 3 ml de extracto pancreático, colóquelos en un Baño de María a los 15 minutos retire el erlermeyer N°1 añada 5 ml de etanol, 3 gotas de fenolftaleína y titule con KOH al 0.05 M, a intervalos de 15 minutos retire los otros erlermeyer y repita con cada uno el procedimiento anterior. Compare la titulación con el blanco.

1. Acción del taurocolato sobre los lípidos:

Repetir el experimento anterior pero además del extracto pancreático agregar 2 ml de Ácido Taurocólico (bilis). ¨reparae igualmente para este ensayo un blanco o testigo

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