HISTOLOGIA HUMANA- PRACTICA

[pic 1]INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL[pic 2][pic 3]

CENTRO INTERDISCIPLINARIO DE CIENCAS DE LA SALUD

UNIDAD SANTO TOMAS

UNIDAD DE APRENDIZAJE:

HISTOLOGIA HUMANA

PRACTICA I: MICROSCOPIO

PROFESOR:

FERNANDEZ HERNANDEZ SAID

DEL MORAL LAGUNA ELIA ADRIANA

ALUMNO:

FUENTES VARGAS GPE. JIMENA

1TV11

MARCO TEORICO.

Partes del microscopio.

[pic 4]

-OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo. 

-OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta. 
-CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación. 
-DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. 
-FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. 
* Sistema mecánico 
-SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. 
-PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación. 
-CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular. 
-REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. 
-TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto. 

Funcionamiento.

La iluminación de Köhler es una de las claves de la buena microscopia y está incorporada al diseño de casi todos los microscopios modernos que se usan en laboratorios o para la investigación.

En las figuras adjuntas se ilustran los dos trayectos de los rayos luminosos y todos los controles de ajuste de un microscopio moderno deberá emplearse como guía al seguirlas instrucciones que se dan a continuación para obtener una iluminación adecuada en el microscopio.

[pic 5]

Los ajustes necesarios para conseguir una buena iluminación de Köhler son pocos y sencillos:

1. Se cierra el diafragma de campo.
2. Se enfoca el condensador moviéndolo hacia arriba o hacia abajo hasta que el contorno de su diafragma de campo aparezca bien nítido (en foco)
3. Se centra el diafragma de campo con los controles de centrado de la suplanta (donde está el condensador). Luego se abre el diafragma de campo hasta que el haz luminoso cubra todo el campo observado.
4. Se retira el ocular (o se utiliza el telescopio de centrado o un accesorio telescópico de fase, si se dispone de ellos) y se observa la pupila de salida del objeto. A medida que se cierra el diafragma del condensador su contorno aparecerá dentro de este campo auricular. Para la mayor parte de los preparados teñidos el diafragma del condensador deberá cerrarse hasta cubrir aproximadamente dos tercios de la apertura del objetivo. El resultado de este ajuste es la avenencia máxima entre resolución y contraste (que no es más que la diferencia de intensidades entre las regiones claras y oscuras de la muestra).

Si se ponen en práctica estos 5 consejos simples la imagen obtenida será la mejor que permita la óptica del telescopio.

¿Por qué ajustamos el diafragma de campo para cubrir solo el campo observado? Iluminar un campo más grande que el sistema óptico puede “ver” solo conduce a reflexiones internas o a una pérdida de luz, lo cual da como resultado más “ruido” o una disminución del contraste de la imagen.

¿Por qué se pone énfasis en el ajuste del diafragma del condensador o, en otras palabras, la apertura de iluminación?

Este diafragma ejerce gran influencia sobre la resolución y el contraste con los que se pueden observar ciertos detalles de la muestra.

Para la mayoría de las aplicaciones prácticas la resolución esta determinada por la ecuación:

[pic 6][pic 7]

En donde:

d= distancia entre los puntos del detalle resuelto (en mm)

λ = Longitud de onda de la luz utilizada (verde=540 nm)

AN= apertura numérica o seno de la mitad del ángulo limitado por los rayos más periféricos, que partiendo de un punto cualquiera del objeto, penetran en el objeto (o condensador) y contribuyen a la formación de la imagen, multiplicada por el índice de refracción del medio interpuesto entre el objeto (o condensador) y la muestra.

Las estructuras de la muestra refractan la luz. El ángulo de refracción es directamente proporcional a la longitud de onda e inversamente proporcional entre las estructuras. Según Abbé, un espacio estructural dado solo puede resolverse cuando el sistema óptico de observación (objetivo) puede ver cierta cantidad de la luz refractada que participa en la formación de la imagen, con lo que se resuelven detalles menores y las imágenes son más nítidas.

Sin embargo la formula demuestra que la apertura del condensador es tan importante como a apertura del objetivo y esto es lógico si se considera el ángulo de refracción de un haz oblicuo o uno de apertura mayor. Este ángulo  se mantiene esencialmente constante pero se le presenta al objetivo de manera tal que puede ser captado con facilidad.

...