Kit de purificación de adn
Enviado por josaelias • 3 de Junio de 2017 • Apuntes • 579 Palabras (3 Páginas) • 191 Visitas
BACMAX kit de purificación de ADN Bacteriano ™
Aplicaciones
El ™ kit de purificación de ADN BACMAX fue desarrollado para el aislamiento fácil fiable de ADN BAC de alta calidad. El protocolo escalable se basa en un procedimiento de lisis alcalina modificada que produce típicamente 0,6 a 25 g de ADN de BAC 1,5 a 100 ml de un cultivo fosmid sola copia. Etapas de precipitación selectiva y la incorporación de RiboShredder del Epicentro ™ RNasa Mezcla eliminar eficazmente los contaminantes que degradan el ADN e interfieren con las aplicaciones posteriores.
.Beneficios
- Protocolos simples aíslan hasta 0,6, 15, o 25 g de ADN de BAC de 1,5-, 40 - o cultivos de 100 ml de una sola copia BAC, respectivamente.
- El kit no utiliza columnas o resinas de unión que le dan un rendimientos más bajos y corte del ADN.
- Aisla la cantidad de ADN que se necesita, sin perder los reactivos del kit..
- No hay disolventes orgánicos tóxicos.
Figura 1. Obtener mayores rendimientos de ADN de BAC con el BACMAX ™ Kit de Purificación de ADN. ADN fue aislado de 1,5 o culturas 3,0 ml de un 153-kb sola copia clon BAC y se cuantificó mediante fluorometría con colorante Hoechst 33258. Volúmenes de cultivo fueron los recomendados por los proveedores. |
[pic 1][pic 2] El panel A | [pic 3] El panel B | Figura 2. Panel A. El kit de purificación de ADN BACMAX ™ produce consistentemente ADN de BAC de alta calidad que puede ser utilizado directamente para aplicaciones posteriores como toma de huellas dactilares. BAC ADN aislado a partir de 10 clones diferentes (carriles 1 a 10) se digirió con Hin d III y se analizaron por agarosa electroforesis en gel. Carril M, kb escalera. Panel B. ADN de BAC aislados con el Kit ™ BACMAX no muestra ninguna degradación después de haber sido almacenado durante 1 año a -20 ° C. ADN aislado a partir de un 153 kb y 165 kb de un clon BAC se digirió con inmediatamente Hin d III (carril 1, 153 kb y el carril 2, 165 kb) o almacenada por 1 año a -20 ° C y luego se digirió con Hin d III (carril 3, 153 kb y el carril 4, 165 kb). Las muestras se analizaron por electroforesis en gel de agarosa. Carril M, kb escalera. |
Protocolo traducción BACMAX
Este kit de purificación de ADN fue desarrollado para BACMAX , para obtener un aislamiento fácil y fiable de ADN BAC de alta calidad .1 El protocolo se basa en un procedimiento de lisis alcalina (Toma su nombre ya que hay que romper las bacterias y para sacar los plasmidos , utiliza NaOH y un detergente como el SDS)modificada que se puede utilizar con 1,5 a 100 ml de cultivo. Los rendimientos consistentes de hasta 25 g de ADN de BAC obtenidos a partir de 100 ml de una sola copia BAC , respectivamente . En la etapa de precipitación selectiva y la incorporación de RiboShredder RNasa de Epicentro ™ esta mezcla busca eliminar eficazmente los contaminantes que degradan el ADN e interfieren con las aplicaciones posteriores . No hay necesidad de columnas , resinas, o extracciones orgánica .
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