Las proteínas no son únicamente polipéptidos sino que tienen una secuencia de aminoácidos propia

INTRODUCCIÓN

Las proteínas no son únicamente polipéptidos sino que tienen una secuencia de aminoácidos propia.

Para el estudio de una proteína, es necesario que esta se encuentre pura, por esta razón el primer paso es separar las proteínas. Una de las técnicas que se utiliza para hacer esto se basa en la solubilidad que tienen las proteínas en diversas soluciones salinas.

El hecho de que la proteína se disuelva en medio acuoso se debe a su capacidad de formar puentes de hidrogeno con el agua. La acción de una sal en medio acuoso es liberar el agua unida a la proteína por puentes de hidrogeno, lo cual provoca su precipitación.

Todas las proteínas tienen en común el grado de hidratación, por lo tanto precipitan cuando la concentración de sal es 50%. Otro método de separación de proteínas consiste en hacerlas interactuar con cationes de metales: el compuesto resultante precipita.

En el punto isoeléctrico la carga total de proteínas es cero, las proteínas poseen carga positiva o negativa dependiendo del pH de la solución en que se encuentren y de la mezcla de aminoácidos cargados que contengan. En una solución de una proteína cuando el valor del pH supera el del punto isoeléctrico, los grupos cargados positivamente se desprotonan y por lo tanto la proteína presenta una carga negativa. Si el valor del pH se encuentra por debajo del punto isoeléctrico, los grupos ionizables se protonan y la proteína adquiere una carga positiva.  

Si una proteína con una carga negativa reacciona con un catión, se forma una sal que precipita; si una proteína con carga negativa reacciona con un anión se forma una sal insoluble.

OBJETIVOS

• Observar el efecto que producen algunos agentes fisicoquímicos sobre la solubilidad de las proteínas.
• Determinar el punto isoeléctrico de la insulina, basándose en sus propiedades de solubilidad a diferentes valores de pH

RESULTADOS

Tabla 1. Resultados de Salting-out

*En el filtrado 2 tendría que habernos dado negativa la prueba, sin embargo la saturación de la solución de la solución con sulfato de amonio (solido) no se realizó de manera correcta y hubo presencia de proteínas.

Tabla 2. Precipitación por efecto del pH y solventes

Tabla 3. Precipitación por metales pesados

Tabla 4. Determinación del punto isoeléctrico de la insulina

...