Lipidos en la yema de huevo.

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Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Lic. En Química Farmacéutico Biológica

Lab. Bioquímica Celular y de los Tejidos I        

  Grupo: 1452    

Reporte de práctica:

 “Extracción y análisis de lípidos en la yema de huevo-Análisis e identificación de lípidos de la yema de huevo por cromatografía en capa fina”

Equipo 6:

Castro Villeda Diego Alfonso

Hernández Hernández  Mario Reynaldo

Rivera Islas Cinthya Karina

Sánchez Centeno Karen Maraí

Entregar:03/010/2016

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Castro Villeda Diego Alfonso, Rivera Islas Cinthya Karina,

Hernández Hernández Mario Reynaldo, Sánchez Centeno Maraí.
  FES Zaragoza, Universidad Nacional Autónoma de México, Iztapalapa, México.

Objetivos:

• Analizar las propiedades de los lípidos.
• Extraer los lípidos de la yema de huevo.
• Cuatificar fosfatos de lípidos fosforilados y no fosforilados.
• Analizar la importancia biológica de los lípidos presentes en la yema de huevo.

• Identificar los lípidos de la yema de huevo, por medio de la técnica de cromatografía en capa fina.
• Estudiar los fundamentos de la cromatografía en capa fina.

• Cromatografía en capa fina de lípidos.
  Revelador: Yodo
  En cada aplicación hay una mancha sobre la placa, ya que la mayoría de los lípidos que tiene la yema de huevo poseen un ácido graso insaturado, dicha insaturación es detectada por el yodo.[pic 6]

Revelador: Bismuto[pic 7]

En ésta placa se espera observar los lípidos que tienen colina, de acuerdo a la referencia las manchas en la placa no concuerdan con la posición en la que se deberían encontrar los lípidos con colina, a excepción de la mancha señalada en la que se podría hablar de fosfatidilcolina, además de que el tamaño de ésta es proporcional a su concentración, por lo tanto coincide con la teoría. [pic 8]

Revelador: Molibdeno[pic 9]

Con este revelador se buscó observar fosfolípidos en general. Se puede ver como hay una mancha mas grande seguida de una mas pequeña. Es decir que de lado izquierdo se aplicó la muestra de lípidos fosforilados y de lado derecho los no fosforilados, pero se ve una pequeña mancha debido a que no fueron separados de manera correcta y un porción de lípidos fosforilados quedó en los no fosforilados.

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Revelador: Ninhidrina

De acuerdo a la teoría los lipidos neutros aparecen en la placa pegados al frente del eluyente. La mancha de abajo podría ser la fosfatidiletanolamina basándonos en el tipo de revelador que es (revela aminas) y la distancia a la que se encuentra comparándolo con el esquema teórico.[pic 11]

Resultados:

• Curva estándar de fósforo.

• PM del KH2PO4 (fosfato monopotasico): 136.09 g/mol

• PM de P (fosforo): 31g/mol
• KH2PO4 estándar: 0.4394g en 1000mL

En 136.09 g de KH2PO4 hay 31g de fosforo, por lo tanto en 0.4394g de KH2PO4 hay 0.10009g de fosforo

0.10009g/1000mL →0.10009 mg/mL. Después se tomó un mL y se llevó a 10 mL: 10.009µg/mL (Patrón)

Los líquidos resultantes se aforaron a 50 mL y se tomo una alícuota de 1mL es por eso que el factor de dilución es 50. Por lo tanto la [S] es:

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