Macrofagos Afectados Pro E Alcohol

EFECTOS AGUDOS DEL ALCOHOL EN LA RESPUESTA INMUNE

E. Garcíaa, L. I. Terrazasb , I. Riverab , M. Rodríguez-Sosab

a Módulo de Instrumentación y Laboratorio de la Carrera de Médico Cirujano. Facultad de Estudios Superiores Iztacala. UNAM. Tlalnepantla Edo. de México. egarcia@campus.iztacala.unam.mx

b Unidad de Biomedicina, Lab de Inmunoparasitología. Facultad de Estudios Superiores Iztacala. UNAM. Tlalnepantla Edo. de México. rodriguezm@campus.iztacala.unam. mx

RESUMEN:

El consumo de alcohol es reconocido como un riesgo para el desarrollo de diversas enfermedades así como para las infecciones oportunistas. En este estudio nosotros examinamos los efectos del etanol sobre el sistema inmune en un modelo de ratón. Ratones hembras BALB/c fueron tratadas intraperitonealmente con 400μl de etanol al 20% v/v- sol. salina y como controles se utilizaron ratones tratados únicamente con sol. salina. Se evaluó el número de células totales del bazo, la proliferación celular y la producción de citocinas de estas células estimuladas con Con A (IL-4, IL-10, IFN- y TNF-). Se obtuvieron macrófagos de la cavidad peritoneal y se estimularon con LPS, y se determinó la producción de TNF-Se analizó el reclutamiento de células F4/80+/Gr1+ en la cavidad peritoneal. Los resultados obtenidos mostraron que la administración de etanol no modificó el número de células totales de bazo, pero sí redujo la capacidad de respuesta proliferativa de las células. Los linfocitos de ratones tratados con etanol tuvieron un incremento en la producción de citocinas proinflamatorias, sin embargo la producción de TNF-enlos macrófagos se vió afectada negativamente. Por otro lado, el etanol indujo el reclutamiento de células supresoras F4/80+/Gr1+. Lo anterior sugiere que la exposición aguda al etanol puede facilitar un estado de inmunosupresión.

INTRODUCCIÓN:

México es una de los países mas afectados por el consumo de alcohol a nivel mundial, según la Encuesta Nacional de Adicciones en 2002 el abuso del alcohol y la dependencia al mismo se ha incrementado en los últimos años. El consumo en la población urbana alcanza 35% de la población masculina y 25% de la femenina. Según el Sistema de Diagnóstico para Enfermedades Mentales de la Asociación Psiquiátrica Americana en su cuarta revisión (DSM-IV), 281,907 adolescentes (2.1% de la población rural y urbana) cumplieron con el criterio de dependencia La población urbana adulta alcanzó el 72.2% para hombres y 42.7% en mujeres.1 En el informe de la OMS sobre la salud en el mundo del 2003 el consumo de alcohol es reconocido como un riesgo relacionado con enfermedades de depresión unipolar, enfermedades cerebro vasculares, accidentes automovilísticos e isquemias del corazón, siendo responsable del 9.3% de años de vida perdidos por enfermedad (AVISAS) (14% hombres y 2.4% mujeres). 2 Por otro lado es bien conocido que la dependencia al alcohol ocasiona la muerte a pacientes por cirrosis hepática, hipertensión portal, ruptura de varices esofágicas ocasionando la muerte prematura en estos pacientes.3-4 Además, existen otras enfermedades con incidencia muy alta en pacientes alcohólicos como son el cáncer, la desnutrición, la anemia megaloblástica y las infecciones respiratorias. Kanagasundram y Leevy (1981) mencionan que el uso agudo, moderado o crónico de la ingesta de alcohol aumenta la susceptibilidad a infecciones causadas por diferentes patógenos tanto bacterianos como virales.5 Ruiz y cols. refieren que la ingesta de alcohol mayor a 80 gramos por día es un factor de riesgo para adquirir neumonía severa y el agente mas frecuente es Streptococcus neumoniae seguido de bacilos Gram-negativos entericos y Pseudomonas aeruginosa.6

La primera línea de defensa, conocida como respuesta inmune innata, intervienen células fagocitarías así como el sistema de complemento y moléculas proinflamatorias tales como IFNγ citocinas IL-1, IL-6, IL-12 y el factor de necrosis tumoral α que generan una respuesta de tipo Th1. Por otro lado, la respuesta inmune adaptativa es una protección específica contra agentes infecciosos los cuales pueden ser neutralizados por la producción de anticuerpos y citocinas como son la IL-4, IL-10 dando lugar a una respuesta de tipo Th2.7 Nelson y Kolls (2002) mencionan que el efecto del alcohol repercute en el sistema inmunológico a diferentes niveles. El consumo agudo de alcohol afecta a los macrófagos alveolares reduciendo su capacidad de fagocitar así como también interfiriendo en la producción de TNF-α e interleucina 1β. A nivel de linfocitos polimorfonucleares reduce la quimiotaxis, la adherencia de CD18, en las células T aumenta la apoptosis y disminuye la producción de IL-17.8 Frank y col. (2004) aseveran que el alcoholismo crónico altera la respuesta inmune innata y después de retirar el consumo de alcohol por dos semanas la respuesta inmune adaptativa no responde apropiadamente, dando lugar a la predisposición de infecciones y sepsis.9 Goral y Kovacs (2005) reportan que los efectos del alcohol inhiben la producción de IL-6 y del TNFα lo que da lugar a la inhibición de la respuesta inflamatoria del macrófago.10 Por otro lado, Terrazas, y col (2001) encontraron que los macrófagos, fenotípicamente definidos como Gr1+/CD11b+/F4/80+, inhiben la proliferación in vitro de los linfocitos TCD4+11. En este trabajo, nosotros evaluamos el efecto de la exposición aguda al etanol en la respuesta de los macrófagos a substancias inflamatorias, así como la respuesta proliferativa de linfocitos T, además del reclutamiento temprano de células peritoneales expuestas al etanol. Los datos obtenidos reflejan un efecto diferencial dependiendo de la población celular estudiada. In vivo, el etanol recluta una población de células que expresan F4/80+/Gr-1+, este marcador se ha asociado a una población de macrófagos que inhibe la proliferación celular, por tal motivo la exposición aguda al alcohol podría potencialmente inducir un estado de inmunosupresión.

METODOLOGÍA:

Animales, se utilizaron ratones de fondo genético BALB/c, hembras entre 8-10 semanas de edad de los laboratorios Jackson, los cuales han sido mantenidos por más de 4 generaciones en el bioterio de la Facultad de Estudios Superiores Iztacala en condiciones libres de patógenos de acuerdo con la norma mexicana NOM-062-ZOO-2001.

Administración de etanol, los ratones se dividieron en dos grupos de forma aleatoria. Al primer grupo se le inyecto vía peritoneal 400 μl al 20% v/v de etanol en sol. salina (Pisa) (aproximadamente 2.9g/kg. de peso de etanol), 24 hr y tres hr antes de sacrificarlos. El segundo grupo (control) fue tratado de igual manera pero en lugar de etanol se le administró 400 μl de sol. salina.

Cultivo

...