Metodologia CO2 y Biomasa

RESPIRACIÓN DEL SUELO

Siguiendo la metodología recomendada por Burbano et al. (2002):

-Se pesarán 10 g de suelo que previamente se pasaron por un tamiz de 2 mm y se introducirán en tubos de ensayo de 25 ml.

- Se adicionará agua al suelo presente en los tubos, para que el contenido de humedad corresponda a la capacidad de campo. Junto con el agua se aplicará los tratamientos que recibirá el suelo, a fin de no superar la capacidad de campo.

- Para determinar la cantidad de agua a aplicar para que el sustrato quede a capacidad de campo se harán ensayos previos.

- Se colocará el vial, que va en cada uno de los tubos de ensayo, 0,2 g de BaO2 y 2 gotas de Ba (OH)2, se agitará el vial para que los compuestos se adhieran uniformemente a las paredes de este.

- Se depositará el vial sobre el suelo que se encuentra en el tubo de ensayo y de inmediato se procederá a taparlo.

- El suelo será incubado en condiciones controladas de temperatura.

MEDIDA DE CO2

- Se determinará el CO2 al concluir cada periodo de incubación (7 días).

- Se retirará el vial del tubo de ensayo y se lo colocará en el frasco del calcímetro junto con un tubo plástico que contiene 5 ml de HCl 2N.

-Se enrasara a cero la columna del calcímetro, tomando la precaución de que todas las llaves del aparato se encuentren cerradas.

- El frasco del calcímetro será agitado, para que se pongan en contacto el vial donde se formara BaCO3 y el HCl, con el fin de conseguir el desprendimiento del CO2 .

-Se leerán los milímetros que el líquido desplace en la columna del calcímetro por la presión del CO2 desprendido.

- Se multiplicará los milímetros de la lectura anterior por el factor de conversión para las concisiones del calcímetro y del laboratorio, a fin de expresar los resultados finalmente, en términos de mg CO2 /10g de suelo

- Para la determinación del factor de conversión

a. Si 197,37 g BaCO3 contienen 44,01 g CO2, entonces, cuantos gramos de CO2 están contenidos en 0.252g BaCO3,

197,37 g BaCO3 44,01 g CO2

0,252 g BaCO3      X

X= 0,05619 g CO2 = 56,19 mg CO2

b. (ml desplazados en la columna)(factor)=(56,19 mg CO2)

Por ejemplo: si el desplazamiento de la columna después de realizar 7 replicaciones es 11,11ml, al aplicar la formula anterior (como se muestra en el punto b), se obtendrá:

(11,11 ml) (Factor de conversión)= (56,19 mg CO2)

Factor de conversión = 56,19/11,11

Factor de conversión = 5,058

Tomado de: Burbano, et al. 2002.

CUANTIFICACIÓN DE LA BIOMASA MICROBIANA

La biomasa microbiana se determinará por medio de la metodología de fumigación extracción propuesta por Vance et al. 1987.

- se pesan 10 g de suelo (control) en un erlenmeyer de 250 ml, se adiciona 50 ml de K2SO4 (0,5M), se agita 30 min y se filtra con un papel Whatman 42.  

- Se procede a guardar el extracto a 4 °C hasta su procesamiento.

- También se pesan 10 g de suelo (fumigado) en un beaker de 40 ml, se fumiga con 25 ml cloroformo libre de etanol, se somete a ebullición el cloroformo por 2 minutos y se incuba durante 24 h a 25 o C.

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