PRUEBA DE FOSFATASA

CENTRO DE BACHILLETARO TECNOLOGICO

INDUSTRIAL Y DE

SERVICIOS N° 66

NOMBRE DE LA PRÁCTICA: PRUEBA FOSFATASA

NUMERO DE LA PRÁCTICA: 6

NOMBRE DEL ALUMNO(A): CARRERA FELIPE ANA KARINA

NOMBRE DEL MAESTRO(A): ING. FIDENCIA CASTILLO CERÓN.

FECHA DE REALIZACION: 03 DE OCTUBRE DEL 2014

FECHA DE ENTREGA: 10 DE OCTUBRE DEL 2014

CALIFICACION: 9.5

ESTA PRÁCTICA SE BASA EN LA NORMA: NMX-F-368-1983.

ALIMENTOS. LECHE FLUIDA. FOSFATASA RESIDUAL. MÉTODO DE PRUEBA.

1. OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN

Esta Norma Mexicana establece el procedimiento para determinar la fosfatasa residual en

leche fluida.

COMPETENCIA

El alumno será competente en la realización de la prueba de la fosfatasa en la cual desarrollara habilidades y destrezas para sacar adelante su practica y poder desarrollar y finalizarla correctamente. Reportara correctamente los cambios y resultados de la practica, también será capaz de interpretar los resultados correctamente y explicarlos de manera adecuada.

FUNDAMENTO

La leche contiene varias enzimas una de estas tiene un grado de susceptibilidad al calor que equivale casi exactamente a las condiciones de tiempo y temperatura empleadas en la pasteurización correcta. La fosfatasa alcalina que se encuentra en la membrana del glóbulo graso. Son hidrolasas que catalizan la hidrólisis de los ésteres del ácido fosfórico. Se realiza la prueba de la fosfatasa y se fundamenta en la acción de la enzima fosfatasa alcalina sobre el sustrato fenilfosfato disódico, con liberación de fenol y fosfato. La cantidad de fenol liberada a partir del sustrato es proporcional a la actividad de la enzima. El fenol es medido colorimétricamente después de su reacción con la 2,6 dicloroquinona clorimida (CQC) para formar: Indofenol, el cual es de color azul. El color se mide en unidades Scharer (una unidad es equivalente a 1 microgramo de fenol por ml)

MATERIALES

4 tubos de ensayo

4 pinzas para tubos de ensayo

2 pipetas de 10 ml

1 matraz Erlen-Meyer de 200 ml

1 termometro

1 mechero

1 rejilla de asbesto

1tripie

Baño maria

1 gradilla

INSUMOS

Leche bronca

Peróxido de hidrogeno (agua oxigenada)

TECNICA

1.- Montar el equipo donde se pasteurizara la leche y donde se llevara a cabo el baño maria; el equipo consta de el mechero, el tripie y la rejilla de asbesto.

2.- Pasteurizar 100 ml de leche bronca en un matraz Erlen-Meyer a una temperatura de 62°-65° C por un tiempo de 15 minutos .

3.- Dejar enfriar la leche que ha sido pasteurizada.

4.- Tomar 4 ml de leche bronca (en total 8 ml, 4 ml para cada tubo) se necesitan dos tubos con 4 ml de leche bronca , agregar a un solo tubo un 1 ml de peróxido de hidrogeno; el tubo que solo contiene los 4 ml de leche bronca se toma como muestra patrón.

5.- Repetir el paso anterior pero ahora la muestra es la leche pasteurizada.

6.- Colocar los 4 tubos en el baño maria; dejarlos por un tiempo de 10 a 15 minutos.

7.- Retirar los tubos y observar los cambios entre los tubos que contienen el peróxido de hidrogeno con los tubos patrón.

8.- Reportar los cambios.

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