PRÁCTICA NO.2 “BALANCE DE FERMENTACIÓN”

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGÍA

LABORATORIO DE
FISOLOGÍA Y BIOQUÍMICA MICROBIANA

PRÁCTICA NO.2
“BALANCE DE FERMENTACIÓN”

 Grupo: 6QM1

Sección: 1

Equipo: 4

Alumnos:

Flores Saldaña Nayeli Deni
Gatica Acevedo Jesús Emanuel
Ramírez Santiago José Luis
Salcedo Hernández Roberto

HIPOTESIS

Si la levadura Saccharomyces cerevisiae realiza la fermentación alcohólica de la glucosa, entonces se obtendrán como productos de la fermentación, etanol y dióxido de carbono, los cuales se determinarán por el método de Conway y por gravimetría, respectivamente. Por lo tanto, si los métodos utilizados son los adecuados, se podrá realizar el balance de la fermentación alcohólica llevada a cabo por S. cerevisiae.

OBJETIVOS

• Con base a los resultados obtenidos evaluar el método y a los analistas.
• Realizar el balance de una fermentación alcohólica en S. cerevisiae.
• Calcular con los datos obtenidos experimentalmente, los milimoles de los productos obtenidos.
• Determinar la glucosa fermentada a partir de la glucosa residual obtenida por el método de DNS
• Determinar cuantitativamente el etanol producido como resultado de la fermentación por el método de Conway

RESULTADOS

Índice O/R= 1.52/2.64=0.57

Carbono recuperado= 3.4/6X100=56.66%

DISCUSIÓN

Se determinó la glucosa residual usando el método del DNS el cual se basa en la reducción del Ácido 3-amino-5-dinitrosalicílico al interactuar con un azúcar reductor (Glucosa).

Se utilizaron dos alícuotas para asegurar que los datos obtenidos entraran en la curva tipo y poder obtener a partir de estos y de una serie de ecuaciones la glucosa fermentada por Saccharomycescerevisiae

Los resultados obtenidos demuestran que la fermentación fue mínimadebido a que, teóricamente por cada 180mg de glucosa se deben de obtener 1mmol de glucosa fermentada. Esto pudo deberse a varios factores:

• Las condiciones no fueron las ideales para que se llevara a cabo la fermentación total de la glucosa. A pesar de que se mantuvo las condiciones de anaerobiosis, la temperatura de incubación no fue regulada ni medida.
• No se agitó la mezcla al adicionar la glucosa por lo que al principio no todas las levaduras estuvieron en contacto con la glucosa.

Al agitar la mezcla se derramó un poco de NaOH lo cual cambió el pH afectando la actividad de las levaduras.

Determinación de etanol por el método de Conway

Se utiliza un sistema de cámara cerrada que permite la determinación de sustancias susceptibles a la volatilización y fijación en condiciones apropiadas,en el experimento el alcohol difunde sobre una mezcla oxidante de dicromato de potasio en ácido sulfúrico, el ión crómico de color amarillo-naranja se reduce a ión cromoso de color verde-azul y el etanol es oxidado cuantitativamente a acetaldehído, ácido acético y agua.

Los resultados esperados de la cuantificación de etanol por este método son de 0.74 mmoles  y los resultados obtenidos son 0.4956 mmoles de etanol lo que indica que la cuantificación se vio afectada por diversos factores como son: la temperatura ya que a 30º se observa la mayor difusión del etanol y es un parámetro que no se considero en el experimento y la longitud de onda optima para la determinación de etanol es de 405 nm [5]

Determinación de CO2 por gravimetría

Se sabe que de los productos que se generan en la fermentación alcohólica 2 moles son de dióxido de carbono mientras que otros 2 son de etanol (Vázquez, H.J., Dacosta, O. 2007), en base a ello en la experimentación se esperaba obtener, teóricamente, 2 milimoles de CO2 y 2 milimoles de etanol, o un valor aproximado. Sin embargo se observó que se obtuvo menor cantidad de dióxido de carbono y mayor cantidad de etanol. Esto habla de pérdida de CO2 durante su cuantificación.

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