Práctica 5.1 Curva de calibración de azúcares reductores 4QM1 S3

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL[pic 1][pic 2]

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL

Práctica 5.1 Curva de calibración de azúcares reductores 4QM1 S3

• González Cruz Mariana
• López Rodríguez Daniela Monserrat  

OBJETIVOS

Elaborar   una   curva   tipo   de   azucares reductores.

Encontrar la relación entre la concentración de azucares reductores y la absorbancia de las

muestras.

RESULTADOS

Tabla 1 Valores de μmoles de azúcar reductor y absorbancia

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Figura 1 Curva tipo de azucares reductores donde la línea punteada representa la línea de tendencia y los puntos marcados lo absorbencia.

REACCIÓN QUÍMICA [pic 4]

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DISCUSIÓN

El procedimiento se basa en una reacción redox que ocurre entre el DNS y los azúcares reductores presentes en la muestra. La D-glucosa es un azúcar reductor que en presencia del 3,5-dnitrosalicilato (que es color amarillo) se oxidará produciendo un color rojo/naranja proveniente del 3-amino-5-nitrosilicilato producto de la reducción del 3,5-dnitrosalicilato. (Bello G.; Carrera B.; Díaz, M.; 2006). Por otro lado la fructosa sólo será un azúcar reductor si estando en un medio básico pasa a ser glucosa es decir por medio de una tautomerización generada por el equilibrio cetoenólico.

“La cantidad de azúcares reductores en la muestra se puede determinar aplicando la ley de BeerLambert, que establece que la absorbancia se relaciona con las propiedades del analito, su concentración y la longitud del haz de radiación al atravesar la muestra (Swinehart,1962)” (Burgos, M.; 2018). Es por esto que podemos explicar que a mayor color presentado, más coloración de glucosa y por lo mismo la absorbancia resultó mucho mayor.

Al graficar los datos y determinar la ecuación de la recta y el coeficiente de correlación (R2), se observa un valor igual a 0.9738. Hay una diferencia de 0.0262, la medición de volúmenes y la lectura de absorbencias pudieron ser factores por los que nos resultó dicho valor. Un coeficiente de correlación cercano a 1 indica perfecta correlación entre los datos al relacionar la concentración con la absorbancia y alta confiabilidad en los datos obtenidos, así como señala un procedimiento experimental efectivo al preparar las soluciones de análisis, es decir, se alcanzan las cantidades estipuladas, protegiendo las muestras de la luz natural. (Burgos, M.; 2018). La ecuación de la recta obtenida por regresión lineal es la herramienta esencial para la determinación de la concentración de azúcares reductores en las muestras de caldo de fermentación. Se despejó la variable de concentración en función de la absorbancia, siendo la variable x la concentración, y la variable y, la absorbancia.        x = y +(0.006) / (0.1128)

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