Practica 2 Bioquimica Medica Uso y manejo del equipo de laboratorio

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA

 BIOQUÍMICA

MÉDICA II

PRACTICA No. 2

USO Y MANEJO DEL EQUIPO DE LABORATORIO

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MÉDICA II

ALUMNO: VAZQUEZ DE LA CRUZ MERLINSA

EQUIPO:

GRUPO: 3CM11

RESUMEN DE LA PRÁCTICA

El procedimiento para la cuantificación en el laboratorio clínico requiere de aparatos y equipos precisos, los cuales deben calibrarse periódicamente. Alguno de los equipos, aparatos utilizados en el laboratorio clínico son los siguientes:

La balanza granataria que esta consiste en dos platos de igual mala suspendidos de los extremos de un brazo apoyado en un fulcro en forma de cuchilla, la forma en que se pesa en esta balanza es colocando en el platillo izquierdo el material a besar y del otro algo con el mismo peso en el caso de los tubos de ensayo para la determinación se pondrán en ambos platillos dentro de un recipiente para poder equilibrar.

Centrífuga clínica esta es usada en el laboratorio clínico principalmente para separar sangre coagulada o células del suero o plasma y para aclarar líquidos orgánicos, que aplica una fuerza centrífuga de fuerza de 1000 a 2500 rpm durante 10 minutos separa la muestra  de una forma correcta, cabe recordar que los tubos debe estar tarados o equilibrados para que no se rompan al igual se deben poner los tipos de una forma encontrada esto quiere decir que espere un frente al otro, al igual para evitar la liberación del material en la centrífuga se debe cubrir con papel parafilm.

Otro material que se utiliza es el baño de calentamiento que se definen como un recipiente con sistema de circulación por medio de una bomba para mantener el equilibrio térmico, si bien este se aplica en determinaciones enzimáticas, pH, electroforesis etc., también debe tener como en general un intervalo de la temperatura.

Si bien uno de los aparatos de mayor importancia es el espectrofotómetro ya que es aquel que se utiliza para determinar la concentración de un analito, este consta de las siguientes partes, fuente de energía radiante, abertura de luz fija de ancho variable, selector de longitud de onda, ranura de salida, un recipiente donde se coloca la muestra en este caso la cubeta o celda, un detector de luz y el mecanismo de medición de lectura. El principio de este consiste en un haz de luz o enérgica radiante con una intensidad inicial que incide sobre una celda y pasa a través de ella que contiene la muestra que absorbe energía radiante a cierta longitud de onda.  Si bien para tener una adecuada lectura la celda tiene que estar limpia y no debe ser agarrada con los dedos en las paredes de esta, así también al inicio para calibrar es colocar una solución blanco del reactivo que contiene solitos y solvente sin los compuestos a medir.

Si bien recordemos que la absorbancia no es una cantidad medible directamente, sino que puede obtenerse por algún cálculo matemático de los datos de transmisión. También se cuenta con la ley de Lambert y Beer que establece que la concentración de una substancia es directamente proporcional a la cantidad de energía radiante absorbida o inversamente proporcional al logaritmo de la energía radiante transmitida.   Por otra parte, la relación matemática entre la absorción de energía radiante, concentración de la solución y longitud del camino óptico se demuestra con la ecuación:      

A= Ebc

donde:

A (es absorba vía a la longitud de onda)

E (coeficiente de extinción molar)

b (longitud del camino de la luz en la solución)

c (concentración de la sustancia de interés)

El equipo en relaciona a la medición de volúmenes, estos tienen como principio ser exactos tanto en los volúmenes como la transferencia  para los análisis clínicos, el material de relevancia es la micropipeta es la que se utiliza comúnmente en el laboratorio esta es operad por un pistón, el procedimiento de este colocar la punta en la solución, posterior a este se procede a presionar el pistón hasta el primer tope posterior dejar que este regrese a su posición original, presionar hasta el segundo tope, para desechar el líquido de la muestra se realiza por las paredes del recipiente.

Para finalizar, en la manera de determinar la concentración de una muestra desconocida es la curva tipo, probando que un cromóforo sigue la ley de Lambert y Beer a una longitud de onda específica, nos da un gráfico lineal, la concentración de una solución desconocida puede ser determinada por medición de su absorbancia e interpolación de su concentración a partir del gráfico de los estándares.  

Ecuación si el cromóforo sigue la ley

Cpr = Apr/ As x Cs

Donde Cpr y Cs son las concentraciones del problema y el estándar respectivamente y Apr y As la absorbancia de la muestra y del problema estándar respectivamente.

RESULTADOS

Tabla 1. Determinación del espectro de absorbancia.

Tabla 2. Valores para elaborar la curva tipo

CUESTIONARIO

1. ¿Por qué es importante utilizar un estándar, un calibrador y un blanco de reactivos?

Si bien el estándar es una disolución que contiene una concentración conocida por su especial estabilidad, se emplea para valorar la concentración de otras soluciones.

El calibrador es importante ya que posee un valor asignado por el fabricante en el control de calidad y se utiliza para estandarizar el método o instrumento de laboratorio.

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