Practica 7 de microbiología

Discusión:

En la práctica se realizaron pruebas con diferentes cultivos de microorganismos. La prueba de la catalasa se hace para comprobar la presencia de la misma enzima. Esta enzima se encuentra en la mayoría de las bacterias aerobias y anaerobias facultativas que contienen citocromos. La prueba de la oxidasa pone de manifiesto la presencia de esta enzima (citocromo c oxidasa). (García, 2004) Estas pruebas se realizan en cultivos de agar nutritivo como medio. Se hizo la prueba de la catalasa en E. coli y este produjo burbujas dando un resultado positivo. También se hizo una prueba de oxidasa en E. coli dando un resultado negativo al ver que no se presentó un cambio de color en las colonias al agregar el reactivo. E. coli es un bacilo corto Gram-negativo, catalasa-positivo, oxidasa-negativo y anaerobio facultativo. (Sánchez, 2011) En el caso de P. aeruginosa al realizar la prueba oxidasa se notó un cambio de color en las colonias (azul) dando positivo en la prueba. Esta enzima se encuentra en una gran variedad de seres vivos, incluso algunas bacterias, por lo que su determinación es de interés taxonómico en bacteriología. Permite distinguir algunos géneros de bacilos Gram negativos, como … Pseudomonas (+). El agar OF se usa para determinar si los bacilos Gram negativos utilizan carbohidratos fermentativa u oxidativamente, o si no los utilizan del todo, lo cual tiene relevancia taxonómica. (Rodríguez, 2005) En el caso de E. coli esta presentó en el tubo con aceite un color verde-amarillento y en el tubo sin aceite la parte de arriba es azulada y abajo sigue amarillo. Con esto podemos decir que los microorganismos son fermentativos. Tal vez no están completamente amarillos, pero esta podría explicarse por falta de incubación. Las bacterias fermentadoras producen ácidos a partir de la glucosa. Viran el cultivo del tubo cerrado a amarillo; en el tubo abierto se inicia el viraje en el fondo, pero transcurridas 24 horas los ácidos pueden difundir por todo el medio virándolo a amarillo. En el caso de P. aeruginosa el tubo con aceite presenta un color verde y en el tubo sin aceite la parte superior cambio a azul y abajo se ve verdoso. Se considera un microorganismo oxidativo ya que hubo un cambio de color en la parte superior del tubo sin aceite, aunque aún no estaba completamente amarillo y como se dijo anteriormente esto puede ser causa de falta de incubación. Los microorganismos apropiados dependen del hidrato de carbono que se agregó al medio basal. Se usa la glucosa como ejemplo. Fermentador: Escherichia coli. Oxidador: Pseudomonas aeruginosa. (Forbes, 2009) El agar TSI se usa para determinar si un bacilo gramnegativo utiliza la glucosa y la lactosa o la sacarosa de manera fermentativa y forma sulfuro de hidrógeno (H2S). (Forbes, 2009) En las pruebas que realizamos en E. coli se presentó todo amarillo demostrando que es un organismo fermentador ya que todo el medio se acidifico. La P. aeruginosa dio como resultado una superficie alcalina y un fondo sin cambio. Salmonella presentó una superficie alcalina, un fondo ácido y una producción de H2S al presentar color negro en el fondo. En el caso de Proteus se presentaron los mismos resultados que en E. coli. Agar inclinado ácido/fondo ácido (A/A) = fermentador de la glucosa, sacarosa o la lactosa: (A/A: Escherichia coli). Agar inclinado alcalino/ sin cambios en el fondo (K/NC) = no utilizador de la glucosa, la lactosa y la sacarosa; esto también puede registrarse como K/K (agar inclinado alcalino/fondo alcalino): (K/NC: Pseudomonas aeruginosa). Un precipitado negro en el fondo indica producción de sulfuro ferroso y H2S gaseoso: (K/A H2S+: Salmonella). (Forbes, 2009) La prueba de ácido sulfhídrico (H2S) gaseoso a partir de los aminoácidos azufrados para producir una reacción coloreada visible, negra, en presencia de un sistema indicador de H2S. (MacFaddin, 2003) En las pruebas que se realizaron los resultados dieron positivos para Proteus y Salmonella, pero negativos para E. coli.

...