Practica 7 Química

Introducción

Una curva de patrón se constituye al graficar valores conocidos de concentración de una sustancia de interés contra las unidades obtenidas al platicar a dicha sustancia un método químico cuantitativo. Por ejemplo en un medio monarca la glucosa reduce al cobre cúprico, para formar oxido cuproso insoluble el cual, a su vez puede reducir al arsonomolibdato formándose un ion colorido. La intensidad del color depende de la cantidad de glucosa presente; la absorbencia de dicha solución puede determinarse colorimétricamente. Al graficar la absorbencia medida versus concentraciones conocidas de glucosa se construye de una curva de patrón. Ahora bien si se tiene una solución de concentración conocida.

Bases químicas.

Al hacer reaccionar glucosa (agente reductor) con hidróxido cúprico en medio alcalino, se forma oxido cuproso (color rojo). El óxido cuproso es insoluble y se precipita, por lo que no puede valorarse colorimétricamente. Cuando se le añade a esta solución fosfomolibdato, este se reduce a un ion de color azul cuya absorbencia puede medirse con un colorímetro.

GLUCOSA (agente reductor) + Reactivo de cobre

Incubación en medio alcalino

Oxido cuproso

Fosfomolibdato

Compuesto coloreado en proporción a la concentración (medible colorimétricamente)

Agua destilada

Compuesto coloreado con volumen adecuado para medición colorimétrica a 450 nm

Objetivos

• Preparar una curva patrón para glucosa

• Determinar la concentración de glucosa de una solución problema interpolando la curva patrón.

Material

• 6 tubos de ensaye de 18 x 150 nm

• 1 gradilla para tubos de ensaye

• 1 pinzas para tubos de ensaye

• 1 baño maría en ebullición

• 1 pipeta de 1ml

• 1 pipeta de 10 ml

• 1 cedilla de plástico de 3.5 ml

• 1 espectrofotómetro a 540 nm

Materiales reactivos.

• Solución de patrón de glucosa (500ug/ml)

• Reactivo de cobre estabilizado en medio alcalino.

• Reactivo de fosfomolibdato

• Solución de glucosa de concentración desconocida.

Metodología.

1. Disponga 6 tubos de ensaye de la manera siguiente:

TUBO 1

(Blanco) 1 2 3 4 5 6

(Problema)

Patrón de glucosa n (ml) 0 0.25 0.50 0.75 1.0 0

Agua destilada (ml) 1.0 0.75 0.50 0.25 0 0

Reactivo de cobre (ml) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0

Sol. Problema (ml) 0 0 0 0 0 1.0

2. Agitar e incubar durante 5 minutos a ebullición

3. Permita que los tubos se enfríen añadiendo:

Reactivo de fosfomolibdato (ml) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1,0

Agua destilada (ml) 9.5 9.5 9.5 9.5 9.5 9.5

4. Agite los tubo.

5. Calibre el espectrofotometro a cero de absorbancia a 540 nm usando el tubo blanco (tubo #1)

6. Enseguida proceda a determinar la absorbancia a 540 nm de cada uno de los tubos que contiene concentraciones conocidas de glucosa (estándares, tubos #2 al 4)

7. Finalmente determine la absorbancia a 540 nm del tubo problema (tubo #6)

8. Tabule las concentraciones de glucosa (ug/mL) de los tubos #2 al 5 contra sus respectivas absorbancia .

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