Practica 7 Química

MICROORGANISMOS PATÓGENOS Y ENFERMEDAD

OBJETIVOS

Comprobar y demostrar la importancia de los postulados de koch.

INTRODUCCIÓN

La relación etiológica entre microorganismos y enfermedad infecciona fue sospechada antes de su descubrimiento por Leeuwenhoek, y por otros autores se confirmó por ejemplo Jenner por medio de la vacunación.

POSTULADOS DE KOCH

1. El germen que produce la enfermedad debe descubrirse en todos los casos observados de una enfermedad determinada, en relación patológica con sus síntomas y lesiones.

2. El germen debe aislarse de las víctimas de la enfermedad en cultivo puro para el estudio de laboratorio.

3. Cuando el cultivo puro se inocula a un animal susceptible posiblemente el hombre debe reproducir la enfermedad o como modificación posterior, originar anticuerpos específicos en el nuevo huésped.

4. El organismo debe poderse aislar en cultivo puro de tales infecciones causadas experimentalmente.

5. Obtener exotoxinas bacterianas inoculadas en animales de experimentación y estudio de cuadro clínico.

MATERIAL

• Ratones

• Jeringas estériles

• Mechero

• Colorantes de gram

• Asa y porta-asa bacteriológica

• Solución salina

Cepas:

• E. coli enteropatogena

Medios de cultivo:

• Citrato de simons

• Caldo de urea

• Manitol rojo de fenol

• EMB

• Gelosa simple

• Verde brillante

• TSI o KLIGLER

• LIA

• SIM

DESARROLLO

-Se limpió el área abdominal de un ratón, e inoculo por vía intraperitonial 1 ml. de una suspensión de microorganismo proporcionado.

-Se tuvo un ratón de control, inoculado por vía intraperitonial 1 ml. de agua destilada estéril.

-Se efectuó el de control, se marcó y guardo en cajas correspondientes.

-Se realizaron diariamente observaciones anotando las anomalías que se presentaron en el trascurso de la semana posterior a la inoculación.

-Se aisló la cepa en los medios EMB, gelosa simple y VB además sembrar en pruebas bioquímicas proporcionadas. Se incubó interpretaron resultados después de 24 horas a una temperatura de 37 oC.

Segunda parte

-Se anestesió al animal, se limpió bien el área abdominal, y por punción se aspiró 2ml. del líquido peritonial y se colocaron en un tubo contenido solución salina estéril.

-Hacer un aislamiento en los medios de cultivo e incubar a 37oC. por 24 horas.

-Se observaron las características coloniales y microscópicas de los microorganismos recuperados de los animales inoculados.

-Se anotó la morfología colonial obtenida en los diferentes medios de cultivo y los resultados de las pruebas bioquímicas, se comparó los resultados de las dos sesiones.

RESULTADOS

ANTES DESPUÉS

Citrato de Simmons Negativo: no se presentó crecimiento en el medio, permanece color verde. Positivo: Se observa el cambio de color de verde a azul, lo que nos indica que Escherichia coli, utilizó el carbono del citrato.

Caldo Urea Negativo, no hubo fermentación.

Manitol Rojo de Fenol Al ser un carbohidrato de origen sintético (derivado de los alcoholes) es fermentado totalmente por Escherichia coli, y lo identificamos por el cambio de color rojo a amarillo.

EMB (Eosina Azul de Metileno) Se observó la presencia de una Hemolisis-α. Hemólisis parcial donde la zona de crecimiento aparece rodeada de un halo de color verdoso. Negativo:

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