Practica cromatografía en capa fina

Cortés Piña Jorge Arturo

Cromatografía en Capa Fina

Objetivo:

Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus características y los factores que en ella intervienen.

Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.

Aplicar la técnica de cromatografÍa en capa fina como criterio de pureza e identificación de sustancias.

Introducción:

La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-líquido (capa fina, papel o columna), liquido-liquido y gases-liquido (fase vapor).

Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido

Todos los sólidos finamente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor  o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente' todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

El Rf es el registro, es una relación de distancias, y se define como la distancia que recorre la muestra desde el punto de aplicación entre la distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.

En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elución de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado.

Procedimiento:

-Para preparar la cromatoplacas se introdujeron  todas en gel de sílice, y se aplicaron las respectivas sustancias con micropipetas hechas con capilares aproximadamente a 1cm de distancia de la base de la placa.

-Las cromatoplacas se introdujeron en la en las cámaras preparadas con diferentes tipos de eluyentes

-En el revelado se utilizo una lámpara de luz ultravioleta ya que la fase estacionaria estaba impregnada de un indicador fluorescente.

Resultados:

Experimento # 1

Se deseo observar el efecto de la concentración para la C. C. F. aplicando tres muestras de la disolución 1 en la misma cromatoplaca pero poniendo en la primera aplicación 1 gota, 3 en la segunda y 9 en la tercera. Se uso ACOEt como eluyente y se revela con luz U.V. y se observo la intensidad de la coloración de las manchas.

[pic 1]

¿Cuál es la relación que existe entre la intensidad de la coloración de las manchas y la concentración de la sustancia, en cada caso?

---La intensidad de las manchas es mayor mientras mayor es la concentración de cada aplicación.

[pic 2]

Experimento # 2

Para saber que sustancia es más y menos  polar eluyendo con hexano, ACOEt y MeOH. Cada eluyente se coloco en distinta cámara con su respectiva cromatoplaca soluciones (2) y (3).

[pic 3]

           Eluyente:         ACOEt                                                  Hexano                                MeOH

Experimento # 3

Pureza de las sustancias. Se utilizaron las sustancias 4 y 5 y se uso ACOEt como eluyente y se revela con luz U.V.

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