Preinforme

PREINFORME: Laboratorio Bioquímica Metabólica-LBM

Nombre y Apellido: Código: Fecha:

ACTIVIDAD UREÁSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLÓGICO

Diagrama Conceptual

1. MATERIALES Y MÉTODOS

1.1 Materiales y Equipos requeridos

Material / Equipo Características

Tubos de Ensayo Con gradilla

Pinzas Para Bureta

Erlenmeyer 125ml

Pipetas 10 y 5 ml

Matraz aforado 100ml

Baño Termostatado Grados Centígrados

Beaker 400ml

Bureta 25ml

Soporte universal Metálico

Muestras Suelo, forraje, harina de concentrado.

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo Fórmula Concentración

Ureasa En Búfer 0.1%

Úrea H2NCONH2 0.25M

Cloruro de Mercurio HgCL2 1%

Ácido Clorhídrico HCl 0.1N

Indicador de Tashiro - -

1.3 Procedimiento

1.3.1. En campo: Se muestrearán 250 g suelo, 200g de forraje y 100g de concentrado, de acuerdo a los protocolos establecidos para tal efecto; las muestras se empacarán en bolsas negras, las cuales se rotularán con los datos de origen.

1.3.2 En el laboratorio: Agitación, centrifugación, medición, adición de NAcl, agitar, rotulación, mezcla, agitación, baño maría, adición de HgCl2, a

gitación, adición de indicador, titulación registro en tabla de datos.

1.3.3 Diagrama de Flujo

2. TABLA DE DATOS

Volúmenes de HCl 0,1N, empleados en la titulación del NH4OH

Tubos Tipo de Muestra ml gastados de HCl 0.1N

B

St

1

2

3

4

3. RESULTADOS ESPERADOS

La cantidad de actividad de actividad ureásica se ordenará de forma descendente de la siguiente forma:

• Muestra de Suelo

• Muestra de Forraje

• Muestra de Concentrado

4. Glosario

• Ureasa: es una enzima que cataliza la hidrólisis de urea a dióxido de carbono y amoníaco.

• Hidrólisis: es una reacción química entre una molécula de agua y otra molécula, en la cual la molécula de agua se divide y sus átomos pasan a formar parte de otra especie química.

• Titulación: es un método corriente de análisis químico cuantitativo en el laboratorio, que se utiliza para determinar la concentración desconocida de un reactivo conocido.

5. Bibliografía:

• Louis Rosenfeld. Four Centuries de Clinical Chemistry. CRC Press, 1999, p. 72-75.

• Martin, PR; Hausinger, RP (1992 Oct 5). "Site-directed mutagenesis of the active site cysteine in Klebsiella aerogenes urease". The Journal of biological chemistry 267 (28): 20024–7.

• Kabri, E; Carr, MB; Hausinger,

...