Queratina

Extracción de queratina. La lana utilizada ha sido la de una oveja de 2 años recién esquilada. La lana ha sido lavada primeramente con agua y jabón para la eliminación de la lanolina y posteriormente enjuagada y aclarada con agua y etanol, tras lo cual se ha secado a vacío. Posteriormente la lana ha sido micronizada en un molino con un tamiz de 0,5 mm. Se han utilizado dos protocolos de extracción. En el primero se han pesado 5 g de lana micronizada y dispersado en 200 mL de una disolución 0,5 M de ácido tioglicólico (HS–CH2–COOH) NaOH pH = ~ 12. La temperatura de la suspensión se ha elevado hasta 50ºC y se ha agitado durante 7 horas mediante agitación magnética, tras lo cual se ha observado la presencia de dos fases; una fase dispersa homogénea y un residuo. El residuo de lana no dispersado ha sido separado mediante filtración con papel de filtro de peso conocido, que posteriormente ha sido secado para determinar el rendimiento de extracción. El protocolo se describe en el Esquema 2. La purificación de la dispersión obtenida se ha llevado a cabo mediante un proceso de diálisis. Para ello, las dispersiones obtenidas se han introducido en membranas de diálisis (Spectra/Por 2, ref. 132680) de corte molecular entre 12.000– 14.000 g∙mol–1, y sumergido posteriormente en un tanque de agua destilada con renovación de agua constante. La purificación se ha prolongado hasta la no detección de trazas de tioglicolato sódico (HS–CH2–COONa), tanto en el agua como en la dispersión de queratina resultante. Para ello se ha realizado un análisis colorimétrico de complejación con cobalto. En presencia de trazas de tioglicolato la disolución se torna de color marronácea (Esquema 2) debido a la formación del complejo cobalto–tioglicolato. De esta manera se han obtenido concentraciones en el rango de 3,3– 4,0 mg∙mL–1, tal y como ha sido determinado por diferencia de pesada tras la evaporación del agua.

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