TP de Reinos Unicelulares

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ESTABLECIMIENTO: “Instituto Superior del Profesorado San Benito” D- 93

CARRERA: Profesorado de Educación Secundaria en Biología - Res. N° 0761/14 CGE

CAMPO: De Formación Específica

ESPACIO: Reinos unicelulares

CURSO: 2º Año.

HORAS SEMANALES: 2 (dos) horas

PROFESORA: Analía Beatriz Francischelli afrancischelli@arnet.com.ar

CICLO LECTIVO: 2016

TRABAJO PRÁCTICO INTEGRADO (alumnos regulares)

FECHA DE ENTREGA: 4 de noviembre de 2016 – 17 de febrero de 2017

1. OBJETIVOS

• Investigar las características y usos del microscopio óptico y el electrónico
• Diferenciar técnicas de desinfección y esterilización
• Realizar tinciones microbiológicas
• Adquirir destreza en la identificación de bacterias

• Aplicar los conceptos adquiridos en el trabajo experimental.

1. METODOLOGIA DE TRABAJO

La docente brindará la Técnica Operatoria referente al presente trabajo práctico, orientará la realización de las actividades, supervisando la corrección de los procedimientos y brindando sugerencias cuando se considere necesario. El informe deberá presentarse en tiempo y forma individualmente.

Actividad N°1: Investigación bibliográfica

1. Realizar un cuadro comparativo de las características y usos del microscopio óptico y del microscopio electrónico.
2. Señalar la diferencia entre esterilización y desinfección.
3. Comparar los métodos de esterilización por calor seco (estufa) y por calor húmedo (autoclave) teniendo en cuenta: mecanismo de acción, tiempo, temperatura y tipo de material a tratar.  
4. ¿Pasteurización es sinónimo de esterilización? Decir en qué casos se aplica la Pasteurización. Fundamentar la respuesta.
5. ¿Qué es un medio de cultivo? Explicar cuando un medio de cultivo es enriquecido, de transporte, selectivo y/o de enriquecimiento.
6. Investiga sobre la utilización industrial de los organismos unicelulares: producción de alimentos y bebidas alcohólicas, tratamiento de efluentes, industria farmacéutica.

Actividad N°2: Observación microscópica en fresco y muestras coloreadas.

Observación en fresco: colocar una gota de la muestra entregada por la docente entre portaobjeto y cubreobjeto. Realizar observaciones al microscopio en 10x, 20x y 40x. Registrar las observaciones

Observaciones de muestras teñidas

Fijación de la muestra

• Se toma un portaobjetos previamente desengrasado y se coloca en el centro del mismo una gota de la muestra utilizando el ansa ojal. Se extiende con el ansa en forma de capa delgada y uniforme.
• Se procede a la fijación del extendido. Para ello se pasa lentamente el portaobjeto, en forma horizontal, sobre la llama del mechero manteniendo el extendido hacia arriba. La operación se repite hasta sequedad total, cuidando evitar la combustión del extendido.

Tinción simple

Sobre el extendido seco se colocan unas gotas de azul de metileno y se deja actuar 2 o 3 minutos. Se elimina el exceso de colorante lavando con agua de forma suave, con ayuda de pipeta. Se seca el extendido.  Se observa al microscopio en 100x. Registrar las observaciones.

Tinción diferencial. Método de Gram

Sobre el extendido realizado se realiza el siguiente tratamiento:

Se tiñe 20seg con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre con solución

Yodada durante 30seg y se lava con agua, decolorar con mezcla alcohol etílico/acetona 10seg. Escurrir y cubrir con Safranina (color de contraste) durante 20seg. Lavar y secar. Observar al microscopio en 100 x. Registrar las observaciones.

Informe:

1. Informar las observaciones en cuanto a forma, coloración, movilidad, agrupación.
2. Realizar dibujos referidos a lo observado.
3. ¿Cuál es la aplicación de las preparaciones en fresco? ¿Y de las tinciones?
4. Investigar bibliográficamente o en Internet:

1. Qué es y para qué se utiliza la tinción de Ziehl Neelsen
2. Por qué se emplea la tinción negativa para la observación de cápsulas

1. Dibujar la pared celular de una bacteria Gram positiva y una Gram negativa.

1. CRITERIOS DE EVALUACIÓN

• Elaboración activa y reflexiva del trabajo...............................:   50 %
• Presentación de informe individual en término.......................:   10 %
• Redacción, ortografía y calidad en la presentación..................:   20 %
• Uso de lenguaje específico........................................................:   20 %

1. BIBLIOGRAFÍA

• Ídem planificación de la asignatura

Introducción

   El siguiente trabajo tiene como objetivo analizar algunas cuestiones sobre los Reinos Unicelulares, para ello realizaremos un trabajo de investigación bibliográfica, y un trabajo de análisis de muestras para poder graficar algunos microorganismos.

   Antes de empezar sería bueno analizar algunas cuestiones, que nos ayudaran a tener un mejor entendimiento de los temas que vamos a desarrollar.

• ¿Qué son los microorganismos?

   Son formas de vida tan pequeñas que no pueden ser observadas a simple vista. Que sean muy pequeños no quiere decir que sean simples, existen tantos tipos de microorganismos como tipos de complejidad. En este grupo están incluidas las bacterias, los virus, los mohos y las levaduras.

• ¿Cómo podemos observar a los microorganismos?

   La forma correcta de observar microorganismos es con el microscopio, pero vale destacar que dependiendo del tamaño y de lo que deseemos observar específicamente, debemos tener en cuenta que tipo de microscopio usaremos, además de las preparaciones que podemos hacer para mejorar su observación.

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