TRANSAMINACIÓN
Enviado por Jose Angel Argueta Sandoval • 21 de Noviembre de 2019 • Ensayo • 621 Palabras (3 Páginas) • 196 Visitas
INTRODUCCIÓN.
Una reacción de transaminación es la primera etapa de la desasimilación de los aminoácidos, y sirve para encauzar los grupos amino hacia el α-cetoglutarato, para transformarlo en glutamato que posteriormente será sometido a una reacción de desaminación oxidativa, catalizada por la glutamato deshidrogenasa, formándose un ión amonio que será utilizado para generar urea.
La reacción catalizada por las transaminasas es la siguiente:
aminoácido (1) + α-cetoácido (1) <==> α-cetoácido (2) + aminoácido (2)
En las células existen muchos tipos de transaminasas que utilizan el α-cetoglutarato como aceptor del grupo amino, pero se diferencian entre ellas por la especificidad respecto al aminoácido utilizado.
Las reacciones catalizadas por tales enzimas son fácilmente reversibles (su constante de equilibrio, de hecho, está muy cercana a 1).
Todas las transaminasas utilizan el mismo grupo prostético, el piridoxal fosfato (una forma coenzimática de la vitamina B6), que es transportador temporal del grupo amino.
OBJETIVO.
Cuantificar la actividad de la transaminasa ALAT/TGP presente en un extracto crudo de hígado empleando, un método cromatográfico y otro espectrofotométrico.
[pic 3]
ESQUEMA A ESCALA DEL CROMATOGRAMA OBTENIDO.
[pic 4]
Al efectuar la cromatografía en papel Whatman, poniendo en manifiesto el ácido glutámico en diferentes cantidades, además de colocar la muestra problema con su respectivo testigo, y una muestra de alanina, está para identificar la muestra que no reaccionó con el testigo. El problema nos determinara la actividad enzimática con los sustratos y el testigo nos permitirá saber la concentración de alanina que no reacciono y que reaccionó como podemos observar en nuestros resultados.
VALORES DE RF.
Tabla 1. Valores de RF obtenidos. | |||||||||
Muestra | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | T | P1 | R | Ala |
RF | 0.25 | 0.27 | 0.29 | 0.29 | 0.28 | 0.46 | 0.25 | 0.46 | 0.46 |
Tabla 2. Valores de μmoles obtenidos. | ||||||||
Muestra | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | T | P1 | R |
μmoles | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 | 0.0167 | 0.2534- | - |
Absorbencia | 0.131 | 0.333 | 0.463 | 0.649 | 0.742 | 0.028 | 0.392 | 0.060 |
[pic 5]
Ecuación de la recta
y= 1.538x + 0.0022
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
Para sacar la concentración se despeja ‘x’ y se sustituye las absorbancias que se tiene del testigo y problema.
Despejando X queda de la siguiente manera
x= y-0.0022/1.538
Absorbancia problema= 0.392
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