Trabajo sobre la comatografía

HPHP49-X,*pMMÉTODOS CORMATOGRÁFICOS DE ANALISIS 1

La cromatografía es un método de análisis usado par ala separación, identificación y determinación de compuestos en mezclas complejas.

-Fase móvil(FM): gas o líquida

-Fase estacionaria(FE)

La separación esta basada en la diferencia de velocidades de migración entre los componentes de muestra.

> Mecanismos de separación

a)Separación por adsorción.

b)Separación por tamaño molecular.

c)Separación por intercambio irónico.

d)Separación por reparto.

coeficiente de reparto=Kd=[A]Fase movil/[A]Fase estacionaria

> Metodos de análisis cormatográfico

a)Análisis por desarrollo

b)Analisis frontal

c)Analisis por desplazamiento

d)Analisis por elución (GC y LC)

>Lecho cromatográfico

a)Cormatografia en columna (empaquetada y tubular abierta)

b)Cromatografía plana o de lecho abierto (en papel y en capa fina (TLC))

Tanto la GC como LC se desarrollan en columna.

> Parametros básicos en cormatografia

a)Retención: capacidad real de la fase estacionaria para retardar la salida de un componente.

tR:tiempo de retención, tiempo que transcurre desde el inicio hasta la señal máxima

Linea de base: registro caduco por la columna pasa solo FM

Pico cromatografico: señal del detector cuando emerge un componente de la columna

Ancho de pico (Wb):se usa apra el calculo del area y para fijar su altura (concentracion del analito)

b)Eficacia de la columna de cromatografia: poder de separacion o resolucion, se relaciona con el ensanchamiento de banda.

H=L/n

n=16(tR/wb)^2

n=L/H

c)Resolucion: medida cuantitativa de la capacidad de la columna para separar los analitos, relacionada con la eficacia.

Rs=2*Az/(wb1+wb2)=2*(tR2-tR1)/(wb1+wb2)

Se busca una resolución máxima en un tiempo mínimo.

La cromatografia se usa para el análisis cualitativo y cuantitativo

CROMATOGRAFIA DE GASES

Distribución de un componente entre una FM gaseosa y una liquida inmovilizada sobre la superficie de un solido inerte (FE).

En la columna se produce la interacción de los solitos con la fase estacionaria, produciendose la separación de los mismos.

Es adecuada para el análisis de compuestos orgánicos volátiles, como gases.

Cuando los analitos no son volátiles, se puede realizar una reacción de derivatización(transformar grupos químicos con presiones de vapor bajas, en otros mas volátiles)

> Instrumentacion en GC.

-Gas portador.

Es la FM y se comporta como un gase ideal y no contribuye al proceso de separacion, solo porta los componentes de la muestra a traves de la FE.

-Sistemas de inyeccion.

Dependen de la naturaleza de la muestra. Su objetivo es evaporar la muestra e introducirla en la columna. Consta de un septum por donde con una microjeringa se introduce la disolución. Si la muestra es un gas, se introduce mediante una válvula.

Tipos:

a) Directa: flujos elevados

b)Split/Splitless: split(la muestra mezcla con el portador se divide en dos partes, una se ventea y otra entra en la columna)(compuestos mayoritarios,poco sensible para el análisis de trazas) y splitless(preconcentración de la muestra)(muestras muy diluidas, trazas).

relación de split=flujo de venteo/flujo en columna

c)On-colum: Se usa para compuestos de baja volatilidad y mezclas de solutos con un rango amplio de

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