Técnicas De Cuantificación De Crecimiento Microalgal

Uno de los estudios básicos a realizar con una cepa de microalga es estimar su crecimiento, el cual se expresa usualmente como el incremento de biomasa por unidad de volumen. Existen varias formas de estimar dicho incremento en biomasa, entre ellas: conteo de células, espectrofotometría y peso seco.

Conteo de células: generalmente se realiza día por medio, por un periodo de tiempo que dependerá de la cepa, expresando los resultados como densidad celular por volumen de cultivo (células/ml). Los datos recopilados permiten realizar curvas de crecimiento que indican cuánto dura la fase exponencial, cuánto tarda el cultivo en llegar a la fase estacionaria y por cuánto tiempo puede ser mantenido el cultivo antes de comenzar a decaer.

Se realiza con una cámara Utermöhl o Neubaüer. La cámara Neubaüer es una especie de portaobjetos que tiene una zona ligeramente deprimida dejando un canal en forma de “H”. Se debe cubrir el canal con el cubre objetos (que cuenta con un tamaño y peso determinado), luego se deja caer 1 ó 2 gotas de la muestra por el espacio que queda libre. La muestra se distribuirá cubriendo 2 cuadrículas, de dimensiones conocidas, que se encuentran dibujadas en la cámara.

Curva de crecimiento

En la inoculación, la densidad celular inicial es el cultivo es de aproximadamente 10.000 celulas/mL. Después de la inoculación estas células crecen y se dividen cada vez más deprisa conforme se van aclimatando a las condiciones de cultivo, este periodo de aclimatación, se llama fase lag. Una vez se adaptan a las condiciones, la velocidad de división celular se acelera y el crecimiento del número de células en el cultivo aumenta, este periodo se denomina fase de crecimiento exponencial. Posteriormente, cuando el cultivo adquiere una cierta densidad, la división celular se hace más lenta, producto del sombreo (menos luz), limitación de nutrientes, pH u otros entra en la fase de crecimiento lineal. Por último, el cultivo entra en la fase estacionaria cuando el crecimiento de la población cesa (tasa de mortalidad = tasa de duplicación)

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