Microbiologia

MEDIOS DE CULTIVO: CRECIMIENTO Y MORFOLOGIA BACTERIANA

Espitia, D1; Mora, D1; Mora, Y1; Páez, Z1

Molano, A2

Escuela Colombiana de Carreras Industriales; Laboratorio Bioquímica; Bogotá, Colombia.

RESUMEN

Un medio de cultivo es una preparación líquida o sólida utilizada para el crecimiento, transporte o mantenimiento de microorganismos. En la práctica se prepararon tres medios de cultivo inoculados, los cuales fueron llevados a incubar para luego, a través de la tinción de Gram, determinar las características morfológicas de los microorganismos presentes y clasificarlos según sea su coloración en bacterias Gram positivas o Gram negativas. Se llevaron a cabo técnicas como transferencia aséptica y extensión en placa al momento de realizar las tinciones, y así, obtener resultados precisos para posteriormente realizar un análisis que se encontrará en el presente informe.

PALABRAS CLAVE

INOCULAR: Se añaden microorganismos a un medio de cultivo.

TINCION: técnica para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio.

MORFOLOGIA: estudio de la forma y estructura de un organismo o sistema.

TRANSFERENCIA ASEPTICA: El asa se calienta hasta la incandescencia. El tubo se destapa. Se pasa el extremo del tubo por la llama. Se extrae la muestra con el asa esterilizada. Se vuelve a flamear el extremo del tubo y la muestra se deposita en un medio estéril. Se vuelve a tapar el tubo. El asa se esteriliza nuevamente.

EXTENSION EN PLACA: Se esteriliza el asa y luego se toma una muestra del tubo. Se realiza un frotis sobre una placa con medio estéril, extendiendo bien los microorganismos, y al final se vuelve a esterilizar el asa.

ABSTRACT

A culture medium is a liquid or solid preparation used for growth, transport or maintenance of microorganisms. In the practice were prepared three culture mediums inoculated, which were carried to incubation and then, through the Gram staining, establish the morphological characteristics of the microorganisms and classify them according to their coloration in Gram positive or Gram negative bacterium. Were carried out techniques such as aseptic transfer and extension plate at the time of make the stainings, and so get accurate results for subsequently make a analysis that will be found in the present report of the practice.

KEY WORDS

INOCOLUM: The microorganisms are added to a culture medium.

STAINING: Technique for improving the contrast in the image seen under the microscope.

MORPHOLOGY: Study of form and structure of an organism or system.

ASEPTIC TRANSFER: The loop is heated to incandescence. The tube is uncovered. It passes the end of the tube by the flame. The sample is extracted with sterile handle. It becomes a flaming the end of the tube and the sample is placed in a sterile environment. Is re-cap the tube. The handle is sterilized again.

EXTENSION PLATE: The handle is sterilized and then a sample tube. A smear on a plate with sterile medium, extending well micro-organisms, and eventually returns to sterilize the loop.

INTRODUCCION

Los medios de cultivo son las soluciones nutritivas que se usan en el laboratorio para aislar microorganismos. Pueden ser químicamente definidos o complejos. El cultivo puede ser inoculado y luego incubado para que éste contenga sólo un tipo de microorganismo (cultivo axénico).

Para examinar detenidamente los microorganismos presentes en cultivos líquidos y sólidos, a menudo hay que fijarlos y teñirlos para aumentar la resolución y acentuar las características morfológicas de éstos, lo cual puede hacerse a través de tinciones. Así pues, la tinción de Gram es el método de tinción más utilizado para clasificar las bacterias en grupos diferentes según sus propiedades de tinción (Gram positivas y Gram negativas).

Con base en lo anterior, el presente informe tiene como objetivo llevar a cabo el aislamiento, obtención, análisis y determinación de microorganismos a partir de una práctica experimental previamente realizada en el laboratorio, la cual será descrita detenidamente en la metodología a seguir y los resultados arrojados posteriormente a la realización de la misma.

METODOLOGIA

En primera instancia se preparan para tres placas de petri los tres medios de cultivo: nutritivo, quimiolitotrofo y natural. En el medio nutritivo se pesan 1,26gr de nutrient agar en la balanza analítica, se mezcla de forma homogénea con 45ml de agua destilada en el erlenmeyer, y se calienta a 90ºC en el termostato. En el medio quimiolitotrofo se pesan 0,045gr de yeast extract, carbonato de calcio, glucosa y fosfato dibasico de potasio, 0,67 de agar agar y 0,09 de cloruro de sodio; se mezclan de forma homogénea con 45ml de agua destilada en el erlenmeyer y se calienta a 90ºC. En el medio natural se pesan 30gr de maceración de papa criolla en la balanza de brazo para luego con 30ml de agua destilada filtrar a un erlenmeyer hasta producir el caldo de papa; vertimos 0,045gr de agar agar y lo llevamos a hervir a 90ºC. Al tener los tres medios preparados, se llevan al autoclave por 30 minutos aproximadamente y se dejan en la incubadora por 8 días.

Posteriormente, se prepara la solución de peptona para 10 tubos tapa rosca. Para esto, se pesan 0,1gr de peptona de caseína y se mezclan con 90ml de agua destilada en un beaker, para luego con una pipeta adicionar 9ml de solución a cada tubo y tomar muestras con pólipos humedecidos de transmilenio, cajero, moneda, billete, manos de vendedor y manos de estudiante, dejando cada muestra en un tubo por 8 días.

Después, se preparan los medios de cultivo en tres placas de petri tomando 15ml de cada medio preparado previamente y 1ml de tres de las muestras de solución de peptona tomadas anteriormente, y seguidamente, se dejan las placas incubando por 24 horas.

Al sacar las placas de la incubadora, se procede a contar las

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