Tesis

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SECRETARÍA DE EDUCACIÓN PÚBLICA

Subsecretaría de Educación Superior

Dirección General de Educación Superior Tecnológica

Instituto Tecnológico de Roque

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Practica No 2

 “RECUENTO DE COLIFORMES TOTALES[pic 5][pic 6]

EN PLACA”

Materia: Microbiología de alimentos

Grupo: IV º B Ingeniería Industrias Alimentarias

Alumna:

Juana Jaime Martínez

Maestro:

Mauricio  Daniel García Rosas

                                                                                             ROQUE, CELAYA, GTO

                                                                                                         OCTUBRE 2015

INTRODUCCIÓN^[a]

En la presente practica de coliformes totales en placa, es necesario comprender que el conjunto los coliformes están representados por cuatro géneros de la familia Enterobacteriaceae: Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, y Klebsiella. Todos ellos son fermentado^[b]res de la lactosa en 48 horas.

Se encuentra^[c]n en el intestino del hombre y de los animales, y también en el suelo, las plantas, etc.

Hay que destacar que el recuento de coliformes tiene sus limitaciones como indicador en ciertos  alimentos:

• Productos lácteos: reflejan el estado higiénico del establo y de la planta industrial, no es indicador de contaminación fecal
• Hortalizas congeladas blanqueadas: la presencia de E. coli puede ser indicativo de que en el proceso existe algún problema. Los coliformes están habitualmente asociados con la vegetación
• Derivados de aves de corral: los coliformes tienen un valor acreditado como indicadores higiénicos apropiados.^[d]

Son capaces fermentar la lactosa con producción de gas, siendo esta característica suficiente para hacer determinaciones presuntivas. Su facilidad de cultivo y de diferenciación los hace casi ideales como indicadores

La muestra que se analizó en la práctica fue queso Oaxaca^[e] es tipo de queso fresco, de mayor consumo en México. Es un queso suave de coagulación enzimática, respecto^[f] a sus propiedades fisicoquímicas contiene una humedad entre 40-46%, 24% de proteína así como un pH de 5.0-5.5 y grasa.

El Agar rojo bilis violeta utilizado en la práctica es caracterizado como medio selectivo.La peptona aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. El agar es el agente solidificante. Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo púrpura, de 1 a 2 mm de diámetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.

OBJETIVO

Realizar el recuento de coliformes totales en queso de marca comercial.

MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y/O MEDIOS DE CULTIVO

PROCEDIMIENTO

A.- Agua peptonada.

Véase el procedimiento para la cuenta aerobia en placa.

B.- Agar rojo bilis violeta

1.- Pesar la cantidad de medio necesaria según las instrucciones del fabricante y dispersar en agua.

2.- Calentar hasta ebullición y mantener por 1 minuto.

3.- Dejar enfriar hasta unos 45 °C.

4.- Realizar el vaciado en placas.

NOTA 1: Este medio no requiere esterilización.

NOTA 2: Es medio se prepara el día en que se realice el sembrado en placa.

C.- Siembra por vaciado en placa

1.- Preparar las diluciones  1/10, 1/100, 1/1000.Mezclar agitando el frasco formando un arco de alrededor de 45° (realizarlo 25 veces).

2.- Tomar con pipeta estéril 1 ml de cada dilución y colocarlo en una caja Petri (por duplicado). Sembrar únicamente las tres últimas diluciones.

3.- Vaciar 12 a 15 ml aproximadamente de medio de cultivo, y realizar el mezclado del medio con la muestra como se indica en la práctica de cuenta aerobia en placa. Dejar solidificar.

4.- Adicionar una segunda capa de medio de cultivo a las cajas de Petri con el medio ya solidificado. No requiere ya mezclarlo.

5.- Incubar las cajas en posición invertida a 35 +/- 2°C por 24 +/- 2 horas.

6.- Realizar el recuento de las unidades formadoras de colonias (UFC) presentes en la placa y hacer los cálculos.

RESULTADOS

Tabla No 1

                                                                                                    [pic 7]

Para determinar las UFC/g en la réplica 1 y replica 2

Se realizó un promedio de las réplicas 1 y 2 de disolución de 1:1000 en las cuales se obtuvo UFC/g por tanto se sumó 96 UFC/g de la primera replica más 78 UFC/g  de la segunda réplica,  después el valor dividido entre 2 y la cantidad obtenida multiplicado por 1000 ya que en esta dilución se presentaron las UFC/g.

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