EJERCICIOS TALLER HPLC FUNDAMENTOS BÁSICOS
Enviado por lago_patu • 25 de Noviembre de 2020 • Biografía • 702 Palabras (3 Páginas) • 413 Visitas
EJERCICIOS TALLER HPLC FUNDAMENTOS BÁSICOS [pic 1]
SESIÓN 1 Y 2
PARÁMETRO CROMATOGRÁFICO | CÁLCULO |
Factor de capacidad | K´= [pic 2] |
Número de platos teóricos | N=)2[pic 3] |
Altura de platos teóricos | H=L/N |
Selectividad | α==[pic 4][pic 5] |
Resolución | Rs= [pic 6] |
- Se realizó la siguiente adecuabilidad, indicar si los parámetros cromatográficos cumplen
[pic 7]
[pic 8]
- Se separan seis hidrocarburos aromáticos policíclicos, obteniéndose un tM de 3.4 minutos empleando:
Columna: RP-18 de 25 cm de longitud
Fase móvil: Agua/ACN (50:50)
Velocidad de flujo: 0.8 mL/min
Analito | tR(min) | Wb(min) |
Naftaleno | 5.2 | 0.41 |
Fluoreno | 7.4 | 0.62 |
Fenantreno | 8.3 | 0.81 |
Benzoantraceno | 11.5 | 1.53 |
Criseno | 12.1 | 1.95 |
- Calcule el factor de capacidad para cada uno de los analitos
Analito | K´ |
Naftaleno | |
Fluoreno | |
Fenantreno | |
Benzoantraceno | |
Criseno |
- El número de platos teórico promedio
Analito | N |
Naftaleno | |
Fluoreno | |
Fenantreno | |
Benzoantraceno | |
Criseno | |
Promedio |
- Calcular la resolución para el primer par y el ultimo par de compuestos
Analitos | Rs |
Naftaleno-Fluoreno | |
Benzoantraceno- Criseno |
- De una muestra comercial se extrajeron y purificaron tres compuestos, identificados como A, B y C por HPLC
Analito | tR(min) | Wb(min) |
No retención | 0.98 | - |
A | 1.72 | 0.24 |
B | 2.28 | 0.31 |
C | 3.26 | 0.42 |
- Calcular el número de platos teóricos, factor de capacidad, resolución y selectividad
Analito | tR(min) | Wb(min) | N | K´ | Rs | α |
No retención | 0.98 | - | - | - | - | - |
A | 1.72 | 0.24 | ||||
B | 2.28 | 0.31 | ||||
C | 3.26 | 0.42 |
- Para la determinación del flujo optimo de la fase móvil MeoH/0.5% Ac. Acético (30:70) en el análisis de cafeína por HPLC se utilizó una columna phenomenex C18, 3.5 µm, 150 mm x 4.6 mm i.d. variando el flujo del disolvente, obteniendo los siguientes resultados:
Fujo (mL/min) | tR(min) | Wb(min) | N | H |
0.1 | 29 | 1.5 | ||
0.3 | 22 | 0.9 | ||
0.6 | 8 | 0.25 | ||
1.2 | 3.5 | 0.13 | ||
1.6 | 2.2 | 0.09 | ||
2 | 1.1 | 0.05 |
- Completar la tabla e indicar ¿cuál es flujo óptimo?
- Se realizo el análisis de Tiamina (B1) y Riboflavina (B2) bajo las siguientes condiciones cromatográficas
Columna: C18, 3.5 µm, 150 mm x 4.6 mm i.d.
Fase móvil: Metanol/Agua (80:20)
Volumen de inyección: 10 µL
Velocidad de flujo: 0.6 mL/min
...