Enzimas Usadas En Biotecnologóa

ENZIMAS EMPLEADAS EN LA BIOTECNOLOGIA

ENZIMAS USADAS EN INGENIERÍA GENÉTICA

Las enzimas son estructuras proteicas dotadas de características y cualidades que las hacen indicadas para la realización de todas aquellas funciones biosintéticas y fisiológicas necesarias e indispensables para el mantenimiento de la vida. Si en una solución hay 1.000 compuestos diferentes, la enzima actúa sólo sobre uno o sobre unos pocos que tienen las características estructurales necesarias para ligarse al sitio catalítico [10] en términos de dimensión, forma, número, tipo de grupos químicos y su disposición espacial. Las endonucleasas (enzimas de restricción) son enzimas cuya función es reconocer y cortar el ADN extraño que puede haber infectado la célula bacteriana. Esta característica ha sido usada por los biólogos moleculares para cortar una molécula de ADN de un organismo en sitios particulares llamados “de restricción”. Sobre la base de los cortes efectuados se distinguen tres clases de endonucleasas y, por sus características, las ENDONUCLEASAS DEL TIPO II se consideran los mejores instrumentos para la tecnología del ADN recombinante.

Fases para la producción de un organismo transgénico

1. El ADN donante es sometido a enzimas de restricción que lo cortan en fragmentos.

2. Las mismas enzimas se usan después para crear sobre el vector unos puntos de rotura complementarios en los que poder introducir el ADN a clonar.

3. Mediante la acción de las otras enzimas (Ligasas) se sueldan los fragmentos del ADN del donante que interesan (genes por determinadas proteínas) a los vectores.

4. El ADN recombinante está, en este momento, listo para ser introducido en las células.

5. La transferencia de las moléculas de ADN recombinante puede darse mediante la transformación o la transducción, procesos que se dan también en la naturaleza, o con nuevas técnicas como la electroporación y la transferencia mecánica de partículas.

6. Si el vector es compatible con el organismo en el que ha sido introducido, se obtendrá su reproducción y la del gen aislado en más copias (clonación), en relación al proceso de división celular.

ENZIMAS UTILIZADAS EN LA GENERACIÓN DE ADN RECOMBINANTE

El requisito primordial para la clonación de un gen o segmento de ADN de interés es poder contar con dicho fragmento en forma individual, aislado desde su entorno génico.

Para ello, la tecnología del ADN recombinante cuenta con una herramienta indispensable, las endonucleasas de restricción. Estas enzimas reconocen secuencias específicas de ADN de 4 a 8 bases de extensión y escinden los enlaces fosfodiéster del material genético en dichos sitios, denominados sitios de restricción. Para actuar como sustrato de estas enzimas, el ADN

...