Salmonella y Shigella

MICROBIOLOGÍA

En relación con este campo realizamos diversos cultivos, para ello empleamos asas de

siembra que previamente pasábamos por la llama del mechero.

Estos cultivos los realizábamos en una

sala destinada a este fin.

CULTIVOS



COPROCULTIVO:

Usamos las siguientes placas:

-

HEKTON

(verde): en esta placa crecía

Salmonella y Shigella

-

CAMP

: crece Campylobacter

Estas dos placas se meten en una caja cerrada con un sobre para conseguir anaerobiosis.

Se deja

48 horas en una estufa a 40ºC, después de este tiempo se procedía a la observación del

crecimiento y del tipo de microorganismo.

-

Caldo de selenito: Es un medio líquido, se deja crecer 24 horas y después de este tiempo de

hace

un pase a una placa

Hekton

y se deja otras 24 horas en estufa normal.

La mayoría de microorganismos patógenos que se observaban eran

Salmonella

.

En las muestras de copro también podemos determinar la

presencia de sangre

. Empleamos

muestras de tres días distintos y utilizamos tarjetas específicas para esto. Levantamos la tapa de la

tarjeta y untamos con el aplicador en la ventana recolectora una pequeña cantidad de muestra

extendiéndola en una capa muy fina. Dejamos secar

durante diez minutos. Extraemos la tarjeta

recolectora y la

introducimos

en un tubo con 2mL de solución de extracción y agitamos durante

diez segundos en el vortex.

Añadimos seis gotas en el pocillo grande del blíster HEM

-

CECK 1. Leer

los resultados a los

diez vemos dos líneas es positivo y si hay una sola será negativo.

-

Parásitos en copros:

Se deben mirar primero en fresco, (para detectar la presencia de oxiduros).

Al microscopio:

-

En bote se echa un poco de colorante con un poco de muestra y formol al 10

%.

-

Se deshace y remueve y se mira al freso al microscopio.

-

Si no se detecta nada se debe:

-

Echar 150

μ

L de R1, 2ml de R2.

-

Mezclar y filtrar con una gasa.

-

Se echa solución salina y se filtra nuevamente.

-

Centrifugar 5minutos y tirar el sobrenadante.

-

Se

remueve en el rotor y se echan 3ml de formol (5 minutos).

-

Añadir 1,5 ml de dietiléter y agitar.

-

Centrifugar 3 minutos y tirar el sobrenadante.

-

Observación al microscopio.



UROCULTIVO:

La mayoría de los cultivos eran de orina. Para esto utilizábamos una asa

de siembra calibrada para

poder cuantificar colonias, para considerar infección tenían que pasar de las cien colonias por

placas.

Las placas empleadas eran:

-

COS (agar sangre): donde crecen bacilos gran negativos y cocos.

-

McConkey: donde crece todo tipo

de bacilos

Se meten en la estufa incubando 24 horas, tras este tiempo se procedía a la observación de las

mismas.



FROTIS FARINGEO:

1.

-

Prueba directa:

Es una prueba inmediata. Se pone la muestra líquida en una banda. Si en la banda aparece una tira

coloreada azul es una prueba positiva para Streptococcos.

2.

-

Cultivos:

-

CNA: en ella crecen Streptococcos β hemofílico del grupo A. Se reconoce porque apare

ce un halo

alrededor de la colonia.



EXUDADO VAGINAL:

Se empieza a sembrar siguiendo un orden de placas dado que la muestra puede ser escasa y se

deben cultivar aquellas que en principio son más importantes:

-

VCA3: se detecta el crecimiento de

Gonococos

.

E

s un medio selectivo. Se deja

48h en una jarra con

velas.

-

GAR: se detectan

Gardnerellas vaginalis.

Son cocobacilos. También se deja en una jarra con velas.

-

GRAN (medio Granada): crecen

Streptococcos grupo B.

Es importante en embarazadas del tercer

trimestre ya que aunque es normal tenerlo, en el momento del parto puede infectar al feto y es

peligroso. Si es positivo la placa vira a color naranja. Se debe hacer en condiciones anaerobias por

lo que inmediatament

e después de sembrar se pone un porta encima.

-

SGC: para detectar hongos. Crecen

Candidas

, para ver si es

Candida albigans

se realiza la prueba

de filamentación.

Prueba de filamentación

:

Usamos suero de un paciente “sano”, es decir, de una persona que sep

amos que no esté tomando

antibióticos.

En un tubo de plástico se muelen 200μL de suero humano. Con un isótopo de plástico

arrastramos una colonia sospechosa y lo introducimos en un tubo. Incubamos 24 horas a 37º y

miramos al microscopio.

Si es

Candida albi

gans

deben filamentar, si no lo hace lo informaremos como

Candida especies.

-

McConkey

: detecta enterobacterias (bacilos coliformes).

-

Roiron: medio líquido para detectar

Trichomonas

.

Estas placas crecen en la estufa de 37º durante 24 horas en condiciones a

eróbicas.

También realizamos

la tinción de GRAM en un porta: un minuto cada uno de los tintes sobre el

...