Crecimiento de las células THP1
Enviado por Olga_28 • 18 de Abril de 2015 • 660 Palabras (3 Páginas) • 137 Visitas
El ensayo con el que se analizó el crecimiento de las células THP1 y Vero por 7 días, aproximadamente, mostró que las celulas Vero tienen un crecimiento más rápido y generan un mayor número de células en el mismo intervalo de tiempo que las celulas THP1.
Por otro lado, las células Vero mostraron, por citometría de flujo, un bajo porcentaje de invasión en comparación con las células THP1, siendo este último el mejor modelo celular para invasión con T. gondii. Esto fue confirmado por Bouchot, et al. (7), el cual utilizó la línea celular THP1 por su rápido crecimiento y alto rendimiento al ser infectada por T. gondii, cepa RH, lo que le permitió hacer un análisis de los cambios que sufre la membrana y el citoplasma de dichas células al formarse la vacuola parasitófora.
Sin embargo, existen reportes que confirman a las células Vero como el mejor modelo para trabajar rendimiento y viabilidad de T. gondii, por encima de las células THP1. Uno de estos reportes es el de Saadatnia, et al. (8), en el que se observó que las células Vero permiten la obtención del parásito con un alto porcentaje de viabilidad y bajo grado de contaminación, demostrando que la confluencia celular del 85 % en medio DMEM con suplemento de suero fetal bovino al 10 % y con una cantidad inicial de taquizoítos de 1 x 107, son las mejores condiciones para sembrar este parásito en estas células. Estos autores, después de tres días infección, obtuvieron una cantidad aproximada de 7,8 x 108 taquizoítos por placa, con 99 % de viabilidad y 3 % de contaminación por las células huésped.
Por otro lado, Meerschman, et al. (9), demostraron una producción de 10 millones de taquizoítos de T. gondii, cepa RH, por ml durante seis días en células Vero, mientras que nuestro estudio se centró en las células THP1 con una producción aproximada de 15 millones de taquizoítos por ml, durante 10 días.
Para obtener una adecuada proliferación del parásito en la línea celular Vero, la mayoría de autores describen que el medio de cultivo RPMI-1640 sin suplemento es el óptimo, lo cual es contradictorio con este estudio, ya que para el crecimiento del parásito en las células Vero se empleó medio de cultivo DMEM con suplemento de suero fetal bovino al 2 %.
La cepa RH de T. gondii bajo nuestras condiciones mostró una citólisis completa a los 10 días, mientras que otros autores (10,11) la obtuvieron al tercero y cuarto día en sus modelos celulares. Esto podría explicarse por el uso de constantes pases intraperitoneales de ratones BALB/C y Swiss-Webster antes de comenzar sus experimentos en cultivo celular.
Se plantea por parte del grupo de trabajo que el realizar solo pases en cultivo celular de la cepa RH de T. gondii, hace que la cepa vaya perdiendo virulencia gradualmente, hasta llegar al punto de no presentar ninguna invasión celular. Sin embargo,
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