Cuando la anfotericina B y la 5-fluorocitosina eran las únicas opciones terapéuticas
Enviado por irisbeth • 12 de Marzo de 2014 • 1.032 Palabras (5 Páginas) • 285 Visitas
15a.1. Fundamento
Cuando la anfotericina B y la 5-fluorocitosina
eran las únicas opciones terapéuticas para el tratamiento
de las infecciones fúngicas profundas, la
realización de pruebas de sensibilidad antifúngica
no estaba muy justificada. A medida que la industria
farmacéutica fue introduciendo en el mercado nuevos
antifúngicos o nuevas formulaciones de los ya
conocidos, se hizo necesaria la realización de pruebas
de sensibilidad con el fin de comparar la actividad
de los mismos y detectar las posibles
resistencias.
Motivado por esta nueva realidad, el
“Clinical Laboratory Standard Institute” (CLSI,
antes NCCLS) realizó, en 1985, una encuesta en
diferentes laboratorios para conocer qué pruebas de
sensibilidad antifúngica realizaban habitualmente y
cómo las realizaban. Además, se les solicitó la
determinación de la concentración mínima inhibitoria
(CMI) a una serie de cepas utilizando su propia
metodología. Los resultados mostraron que pocos
laboratorios realizaban pruebas de sensibilidad antifúngica
y que la metodología empleada (medio de
cultivo, inóculo, etc.) era muy variada. Los resultados
de las CMI también fueron impactantes: en
algunos casos, las diferencias entre los distintos
laboratorios fueron hasta 512 veces mayores.
Como consecuencia de esta realidad el CLSI
creó un subcomité para el estudio y estandarización
de las pruebas de sensibilidad a los antifúngicos en
las levaduras del género Candida y en Cryptococcus
neoformans, que dió lugar a la publicación, en 1992,
de la propuesta de un método (M27-P). En 1995 se
publicó el método provisional (M27-T) y, en 1997,
se aprobó definitivamente el método conocido como
M27-A en el que se incorporan los puntos de corte
de fluconazol, itraconazol y 5-fluorocitosina y las
CMI para las cepas control de calidad. En el año
2008 se publicó un nuevo documento, el M27-A3,
en el que se incluyen los valores de la CMI de voriconazol,
ravuconazol y posaconazol para las cepas
control de calidad. En un intento de facilitar y agilizar
la realización de las pruebas de sensibilidad a
los antifúngicos en los laboratorios clínicos, en 2003
el comité estandarizó el método de difusión en
disco, (documento M44-P) que fue aprobado definitivamente
en 2004 (documento M44-A).
Como complemento del método de sensibilidad
para levaduras, en 1998 el CLSI publicó su propuesta
metodológica para el estudio de sensibilidad
antifúngica en hongos filamentosos (documento
M38-P) y en 2002 aprobó el método definitivo
(documento M38-A).
A pesar de todo, las pruebas de sensibilidad a
los antifúngicos no están tan desarrolladas como las
de los antibacterianos. Los puntos de corte y los
criterios de sensibilidad y resistencia de las levaduras
para los antifúngicos fluconazol, itraconazol y
5-fluorocitosina sólo estaban determinados para las
micosis orofaríngeas de enfermos con sida y para
las candidemias. Por lo tanto, estos datos pueden
variar en el futuro y hay que prestar atención a
las nuevas normas que vayan publicando los comités
de estandarización de ensayos in vitro, tanto
europeo (EUCAST) como americano (CLSI).
Recientemente, una revisión exhaustiva de los
puntos de corte de fluconazol, realizada por Pfaller
y cols. [1], en la que se incluyen 603 candidiasis
invasoras y 692 candidiasis orofaríngeas producidas
por aislados con CMI a fluconazol elevadas, ha permitido
ratificar los puntos de corte de fluconazol
propuestos por el CLSI tanto los determinados por
el método de microdilución como los determinados
por difusión en disco.
En este Capítulo se describen con detalle los
métodos de referencia para levaduras, M27-A3 y
M44-A [2,3], y para hongos filamentosos, M38-A,
propuestos por el CLSI [4]. Básicamente, consisten
en cuantificar la inhibición de crecimiento producida
por el antifúngico comparada con el crecimiento
de la levadura o moho en el mismo medio pero sin
antifúngico (control). El medio de cultivo, pH, tampón,
inóculo, tiempo y temperatura de incubación
...