Embriologia

CROMOSOMAS HUMANOS: CARIOTIPO, MICROSCOPIA

1. Defina los siguientes conceptos

• Sitios frágiles :

Los sitios frágiles comunes se definen como regiones del cromosoma eucariota con tendencia a sufrir fracturas o quiebres frente a sustancias inductoras adicionadas al medio de cultivo linfocitario como la 5’azacitidina. Actualmente en humanos y animales domésticos las regiones de fragilidad cromosómica han sido correlacionadas con heredopatologías diversas (síndrome de retardo mental, paraqueratosis hereditaria, síndrome de calvicie en terneros, alteraciones de la fertilidad).

• Heteromorfismos cromosómicos:

Una variante morfológica normal o una variante en tinción de un cromosoma. Par de cromosomas homólogos que muestran alguna diferencia en forma o tamaño.

• Heterocromatina constitutiva :

Muy condensada dentro de las células del cuerpo. A esta cromatina pertenece la mayoría de los brazos de los cromosomas acrocentricos y los sectores que poseen ADN satélite.

• Fragmento minuto acéntrico:

Fragmento que resulta de dos roturas en un mismo cromosoma, en el que los fragmentos terminales se unen y excluyen al segmento separador (deleción intersticial). El fragmento que se elimina carece de centrómero, por lo que se denomina acéntrico

• Polimorfismo de los satélites:

Son estructuras que tienen una propiedad especial, este polimorfismo de satélites se encuentra en los cromosomas acrocéntricos: 13, 14, 15, 21 y 22 se tiñen mediante bandeo NOR y Q.

• Polimorfismo del cromosoma Y:

Es la porción no recombinable del cromosoma humano Y. El mantenimiento de extendidas características de haplotipos de particulares regiones. Estos revelan trazos de migraciones de colonización de los humanos anatómicamente modernos en el continente euroasiático.

• Gaps

La replicación del ADN ocurre durante la interfase. La síntesis tiene lugar durante una parte limitada, denominada periodo S o sintetico, que a su vez es precedido por dos espacios (GAPS) o periodos de la interfase (G1 y G2) en los que no hay síntesis de ADN.

• Endoreduplicación

Existe una variante de la mitosis que no incluye la división celular. El proceso, que se denomina endomitosis o endoreduplicación, produce células con copias del mismo cromosoma en el mismo núcleo. Las células generadas por la endomitosis se llaman endoploides.

2. Mencione la importancia del uso de los siguientes reactivos en los cultivos celulares para obtener cromosomas in vitro.

• Hidróxido de Bario

En el bandeo C, con un tratamiento con ácido clorhídrico (HCl), Hidróxido de Bario (Ba(OH)2) y desnaturalización al calor se sueltan todas las proteínas asociadas al ADN excepto las más empaquetadas. Este bandeo es muy útil cuando se sospechan daños en las zonas centroméricas como inversiones pericéntricas y para la búsqueda de polimorfismos de heterocromatina de los cromosomas autosómicos 1, 9,16 y la parte distal del brazo largo del cromosoma Y.

• Bromodeoxiuridina (BrdU)

Ayuda a evidenciar las zonas de replicación tardía como zonas claras. Para tal fin se utilizan reactivos afines a la Timina como la Bromodesoxiuridina; la cual es un reactivo análogo de la timina que desplaza dicha base en la síntesis del ADN

• Mostaza de quinacrina

En el bandeo Q se usa mostaza de quinacrina (un tinte de acridina que se une al ADN por intercalación o por unión iónica externa) y estimulando los cromosomas con una luz ultravioleta, se ponen de manifiesto bandas fluorescentes de idéntico patrón al de las bandas G excepto en las zonas heterocromáticas de los cromosomas 1, 9 y 16,en los satélites de los acrocéntricos y en la porción distal del cromosoma Y, que dan una tinción variable.

• Metrotexato

La exposición a metrotexato da lugar a una acumulación de células que tienen copias adicionales del gen DHER. Las copias pueden ser transportadas como ristras extracromosomicas, en forma de cromosomas diminutos dobles, o pueden integrarse en el genoma en el sitio de uno de los alelos DHFR.

• Diepoxibutano (DEB)

Ayuda a ver las rupturas cromosómicas en cultivo de linfocitos.

3. Explique cual es el fundamento y para que se usan las técnicas y marcadores moleculares.

• PCR:

Reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en inglés (PolymeraseChainReaction), es una técnica de biología molecular desarrollada en 1986 por KaryMullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde.

Esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN; su utilidad es que, tras la amplificación, resulta mucho más

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