“Metodo de probabilidad de recuento de bacterias”

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        Facultad de Agricultura e Investigación agrícola.

Ingeniería en alimentos

Microbiología General

Grupo 2 – D

Licda. Cristabel Cruz Muñoz

Insttuctores: Vanessa Segura y Enrique Rivas.

“Metodo de probabilidad de recuento de bacterias”

Melara Moran, Henrry Josue

Miércoles 22 de abril de 2015

INTRODUCCION.

Existen diversos métodos para cuantificar el número de microorganismos presentes en muestras liquidas o solidas.

Asi como los procedimientos basados en diluciones en serio, haciendo crecer microorganismos en medio de cultivo sintético sólido o liquido, como el recuento en placa de unidades formadoras de colonias o como en este caso, la estimación por el método del Número Más Probable (NMP).

Es el método en el que podemos encontrar microorganismos en muestras de alimentos y aguas.

Los Coliformes Fecales son un subgrupo de los Coliformes totales, capaces de fermentar la lactosa a 44º C en vez de 37 ºC como lo hacen los totales.

Aproximadamente el 95% del grupo de los Coliformes presentes en heces están formados por Escherichia coli y ciertas especies de Klebsiella. Ya que los Coliformes Fecales se encuentran casi exclusivamente en las heces de los animales de sangre caliente, se considera que reflejan mejor la presencia de contaminación fecal.

Los tipos de Caldos utilizados se utilizan para que se manifiesten con mas facilidad el conteo de microorganismos en las muestras hechas en el laboratorio.

OBJETIVOS.

Objetivo General.

• Tener muy en cuanta los métodos usados para hacer los medios de cultuvo, es este caso se debe conocer muy bien el de Numero Mas Probable. Para tener excelentes resultados se lleva un orden de pasos para el desarrollo de este método.

Objetivos Específicos.

• Saber identificar las bacterias coliformes totales y coliformes fecales.
• Aplicar bien el procedimiento del método de Numero Mas Probable para tener un buen recuento de bacterias.
• La preparación de los medios, como el Caldo Lactosado y Caldo Verde Brillante mediante el proceso correcto.

MATERIALES.

• Desinfectante
• Alcohol
• Papel higienico
• Papel toalla
• Jeringas
• Viñetas
• 1 ml de leche
• Caldo Lactosado
• Caldo Verde Brillante
• Tubos Bacteriológicos
• Tubo de Durham
• Gradilla
• Lejía

PROCEDIMIENTO.

• Limpiar el área de trabajo con desinfectante, colocando papel toalla en el área de trabajo.
• Definfectar los tubos bacteriológicos y el tubo de durham con alcohol y algodón.
• Colocar las viñetas correspondientes a cada tubo.
• Preparar los medios.
• Colocar 9 ml de Medios, en los tubos bacteriológicos, luego en el tubo patrón colocar 1 ml de leche.
• Pasar 1 ml del tubo patrón al tubo 1:10, luego pasar 1 ml del 1:10 al tubo 1:100, después 1 ml de tubo 1:100 al tubo 1:1000.
• Seleccionar 3 tubos extras para cada muestra 1:10, 1:100 y 1:1000.
• En los tubos extras colocar 9 ml de medio en cada uno.
• Y sacar 1 ml para cada uno de los tres tubos, en total 3 ml de 1:10, 3 ml de 1:100 y 3 ml de 1:1000.
• Se dejan reposar por varias horas entre 18 a 24, para que crezcan los coliformes y asi poder identificarlos.
• Introducir el tubo de Durham boca abajo, en el primer tubo extra de 1:10 para observar si se produce gas.

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RESULTADOS.

Al observar los tubos bacteriológicos la forma de identificar la cantidad es ver si son turbios (Positivos) o transparentes (Negativos). Representados en el siguiente cuadro.

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CONCLUSIONES.

• Es muy indispensable hacer bien los medios a utilizar para observar con claridad las bacterias.
• Es muy necesario dejar reposar los tubos y no menearlos, para no tener malos resultados.
• Tapar bien los tubos para tener buenos resultados.
• Esterilizar las jeringas y los tubos para que no se contaminen de otro microorganismo.
• Era muy importante ponerle la cantidad de ml necesaria para tener un buen crecimiento de bacterias.

RECOMENDACIONES.

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