Recuento De Bacterias Coliformes, Escherichia Coli Y Enterococos En Agua

Recuento de bacterias coliformes, Escherichia coli y enterococos en agua

1. Introducción

La presencia de bacterias patógenas en el agua destinada al consumo humano es un riesgo siempre presente, que se incrementa en las áreas de mayor densidad de la población. La técnica de filtración por membrana (MF) se basa en hacer pasar la muestra de agua problema a través de un filtro de membrana microporosa, en cuya superficie quedan retenidos los microorganismos y posteriormente la incubación de estos microorganismos sobre medios selectivos. Se utilizan membranas que tienen un tamaño de poro de 0.45 micras ya que la mayoría de los microorganismos tienen un tamaño superior (diámetro).

Es muy importante para la salud humana que las aguas destinadas al consumo humano cumplan las normas de calidad básicas establecidas a escala comunitaria. En España la calidad del agua y los métodos de análisis son regulados por:

• Directiva 98/83/CE del Consejo de 3 de noviembre de 1998

• Real Decreto 1138/1990 de 14 de septiembre, por el que se aprueba la Reglamentación Técnico-Sanitaria para el abastecimiento y control de calidad de las aguas potables de consumo público (B.O.E. 20-9-1990)

• Real Decreto 1074/2002 para las aguas envasadas

• Real Decreto 140/2003

• Orden Ministerial O.M. 21936/1983. Métodos oficiales de análisis microbiológicos de aguas potables de consumo público. B.O.E. nº 193. 1983

Tabla 1. Parámetros y valores paramétricos

Parámetro Valor paramétrico Agua de grifo Valor paramétrico Agua envasada

Recuento de colonias Aerobios mesofilos 220 C < 100/ml 220 C < 100/ml

370 C < 20/ml

Coliformes totales Ausencia en 100ml

Escherichia coli

Ausencia en 100ml

Enterococos

Ausencia en 100ml Ausencia en 2500ml

Clostridios sulfitoreductores Ausencia en 100ml Ausencia en 50ml

Pseudomonas aeruginosa Ausencia en 250ml

2. Material

-Agua problema

-Pipetas de 1ml y 10ml

-9 membranas filtrantes de esteres de celulosa, de 0,45 micras de porosidad, de 47 a 50 mm de diámetro, estériles

-Pinzas flameables de extremos planos

-Equipo de filtración por vacío

- Embudos de plástico

-9 placas de Petri de 50*12mm con medios selectivos (3placas por cada medio)

- Mechero de gas

Medios:

a) Medio mFC - permite el crecimiento de Escherichia coli pero no el de otras bacterias. Las colonias tienen color azul oscuro. Composición por litro de medio: Triptosa 10g, Extracto de levadura 3g, Proteosa Peptona 5g, Sales Biliares 4,5g, Cloruro sódico 5g, Lactosa 12g, Azul de amilina 0,1g, Agar-agar 15g. Incubación a 44,50 C durante 24h.

b) Medio m-ENDO - es un medio selectivo debido al lauril sulfato de sodio y al desoxicolato de sodio que inhiben el desarrollo de la flora acompañante, y es diferencial debido a la fermentación de la lactosa. Las bacterias fermentadoras de lactosa producen durante la fermentación aldehídos,

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