PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

INTRODUCCIÓN:

Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el

desarrollo de los microorganismos. Una vez que ha sido preparado, un medio de cultivo

puede ser inoculado (es decir, se le añaden organismos) y a continuación incubado en

condiciones que favorezcan el crecimiento microbiano. El crecimiento de los

microorganismos es el cultivo. Un cultivo axénico o puro contiene un único tipo de

microorganismos.

Los medios de cultivo deben contener los nutrientes y factores de crecimiento

necesarios y deben estar exentos de cualquier microorganismo contaminante.

Los medios de cultivo contienen como mínimo: carbono, nitrógeno, azufre, fósforo

y sales inorgánicas. En muchos casos serán necesarias ciertas vitaminas y otras sustancias

inductoras del crecimiento. También se añaden colorantes que actúan como indicadores

para detectar, por ejemplo, la formación de ácido o como inhibidores del crecimiento de

unas bacterias y no de otras.

El agar es el principal agente solidificante utilizado en medios bacteriológicos. Se

disuelve completamente a 100°C y se solidifica al enfriarse a 40°C.

De acuerdo a su consistencia, los medios de cultivo pueden clasificarse en:

• Líquidos: Se utilizan para el crecimiento de cultivos puros en lote. Se denominan

caldos de cultivo y no tienen agar en su formulación.

• Semisólidos: Contienen 0.5% de agar en su formulación. Se utilizan para estudiar la

movilidad de las bacterias (presencia o ausencia de flagelo).

• Sólidos: Contienen de 1.5 a 2% de agar en su formulación. Estos medios

inmovilizan a las células, permitiéndoles crecer y formar masas aisladas visibles

llamadas colonias. Las colonias permiten al microbiólogo reconocer la pureza del

cultivo; las placas que contengan más de un tipo de colonia no provienen de un

cultivo puro. Las placas de agar también se utilizan para la determinación de células

viables (recuento en placas).

De acuerdo a su composición, los medios de cultivo pueden clasificarse en:

• Definidos: es aquél medio de cultivo del cual se conoce su composición exacta. Son

muy utilizados en estudios fisiológicos. Los medios mínimos son medios definidos

que únicamente le proporcionan al microorganismo los nutrientes necesarios para

crecer, pero no para desarrollarse óptimamente.

• Complejos: es aquél del cual no se conoce la composición exacta del medio. A

menudo, los medios complejos emplean sangre, leche, extracto de levaduras,

extracto de carne u otras sustancias muy nutritivas pero de las cuales se desconoce

la composición química

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