Practica de laboratorio ELISA

Practica de laboratorio ELISA

En el primer paso se añadió el diluyente de la muestra a todos los pocillos ya que a este es en donde se va pegar el virus, después en el paso dos se pusieron los controles positivo y negativo en los pocillos porque con estos vamos a comparar y así verificar si la muestra original es negativa o positiva, ya en el tres pasos es donde se añadió la muestra de suero o plasma ya que con esta es con la que vamos a trabajar y ver si está infectada con un virus, en el cuarto paso se mesclan los contenidos de los micropocillos moviendo suavemente la placa, en el quinto paso se incuba la placa durante dos horas y deben de estar selladas firmemente para evitar evaporaciones, en el sexto paso se lava cada pocillo con la solución de lavado tres veces, se  aspira los contenidos de los pocillos después de cada lavado y después de la aspiración final se elimina el fluido de lavado residual de cada placa golpeándola sobre material absorbente, en el séptimo paso se añade el conjugado a cada pocillo, se incuban las placas selladas con una hoja de plástico durante treinta minutos, en el paso ocho se lavaron los pocillos de la misma forma que en el paso seis, en el noveno paso se añadió el substrato TMB n.°.12 que es un marcador enzimático a cada pocillo y se incubo durante diez minutos de dieciocho a veintiséis centígrados lejos de la luz directa, ya en el décimo y último paso se paró la reacción después de diez minutos añadiendo la solución de frenado n.°.3 a cada pocillo que hace que la reacción se detenga entre el sustrato y la enzima. ¿Por qué el positivo al final es transparente y el negativo de color amarillo?, el color se desarrolla gracias a la acción del sustrato sobre el conjugado.

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