Tecnicas De Inmunologia

ELISA Sándwich (HADAS)

a) Se fijara un anticuerpo monoclonal a las paredes de un recipiente. La unión con estas paredes se debe a que están hechas de plásticos tratados con gran afinidad proteica.

b) El recipiente contiene alguna solución donde se introducirán muestras del antígeno complementario. Está claro que el anticuerpo es especifico y solo quedara unido a al antígeno respectivo, por lo tanto esto confiere un alto grado de exactitud a la prueba.

c) La unión entre el anticuerpo fijado al recipiente con el antígeno introducido es lo suficientemente resistente para resistir la extracción del fluido. Por ende se eliminaran los antígenos que no se unieron a los anticuerpos ya que no correspondían a estos.

d) Después de remover el fluido se volverá a añadir líquido con anticuerpos modificados que contienen una enzima. Estos anticuerpos modificados con enzimas se acoplaran a los antígenos que están ligados a los anticuerpos de las paredes. Si no está el antígeno, los anticuerpos modificados quedaran libres y serán removidos junto al fluido.

e) Finalmente se añade un sustrato enzimático que reaccionara con la enzima del anticuerpo modificado. Esto genera un cambio de color que determinara si la prueba es positiva o negativa. La densidad óptica de la prueba será examinada por un espectrofotómetro.

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