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LABORATORIO BIOQUÍMICA CELULAR (BQA145)


Enviado por   •  23 de Agosto de 2017  •  Trabajo  •  342 Palabras (2 Páginas)  •  148 Visitas

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FACULTAD DE CIENCIAS[pic 1]

INSTITUTO DE QUÍMICA

CARRERA DE BIOQUÍMICA

LABORATORIO BIOQUÍMICA CELULAR (BQA145)

Laboratorio 6: Problema Práctico Nº2

En el presente trabajo práctico usted deberá elegir una matriz biológica para posteriormente extraer dos de las siguientes macromoléculas: proteínas o ácidos nucleícos (RNA), más carbohidratos o lípidos para su futuro análisis. Tenga en consideración que en la elección de su matriz biológica para la extracción de UNA de las macromoléculas mencionadas debe considerar la viabilidad de la extracción. Esto es tamaño, textura, método de homogenización, etc.

Se les sugiere que para extracción de sacáridos se utilicen frutos y vegetales en general los cuales son conocidos por tener altos niveles de estos. Para la extracción de lípidos se sugiere que utilicen por ejemplo palta, lácteos, etc; ya que matrices como ellas son de fácil extracción (no se recomiendan alimentos o muestras muy duras como maní o almendras). Para proteínas y ácidos nucleicos se sugiere matrices blandas y frescas, fáciles de moler para una óptima lisis celular. Recuerden que utilizaremos homogeneizadores como morteros y vástagos. Considere también la cantidad de material a utilizar para la extracción. En general se utiliza de 1 a 2 cm2 de matriz.

Objetivo.

Extraer diferentes macromoléculas a partir de muestras elegidas por los alumnos.

Materiales y reactivos.

  • Gotarios
  • Tampón Fosfato 100 mM pH 7
  • Pipeta graduada de 10 mL
  • Buffer de carga ác. Nuc.
  • tubos de ensayo
  • Metanol
  • vasos precipitado 100 mL
  • Cloroformo
  • espátulas
  • Fenol/Cloroformo
  • Morteros
  • Tampón Fosfato 100 mM pH 7

  • Buffer de lisis prot.
  • Tubos de microcentrifuga 1,6 ml
  • Propipetas
  • Micropipetas

Procedimiento.

Basándose en las guías 4 y 5 y en sus anotaciones en el cuaderno, Diseñe una metodología y/o técnica apropiada y con la ayuda de los docentes a la extracción de su macromolécula elegida desde su muestra biológica. CADA GRUPO DEBERÁ ELEGIR SÓLO DOS EXTRACCIONES.

GUARDE EL RESULTADO DE SU EXTRACCIÓN EN HIELO Y LUEGO CONGÉLELO PARA SU FUTURO ANALISIS MEDIANTE SEPARACIÓN


Preguntas.

...

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