LABORATORIO DE BIOQUIMICA

UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA[pic 1][pic 2]

FACULTAD DE AGRONOMÍA

ÁREA DE CIENCIAS

                SUBAREA DE CIENCIAS QUÍMICAS

                           LABORATORIO DE BIOQUIMICA

[pic 3]

INTRODUCCION

Las proteínas son compuestos orgánicos constituidos por muchos aminoácidos unidos por enlaces peptídicos que intervienen en diversas funciones vitales esenciales en los seres vivos. Los aminoácidos poseen un orden para formar una proteína única en estructura y función, en el laboratorio de bioquímica se tomaron en cuenta algunos de los 20 alfa-aminoácidos para poder identificar su presencia en una muestra vegetal, la cual se escogió semillas de soya. Es necesario  llevar a cabo un proceso llamado extracción de proteínas para analizar la presencia de las misma,  inicialmente las proteínas se extrajeron de la harina de soya previamente preparada. Llevando a cabo  la extracción acuosa y la extracción salina para un estudio cualitativo, respectivamente a estos dos extractos, además de tres muestras patrón, se les sometieron a pruebas cualitativas para identificar si en ellas existían proteínas ya sea por metales pesados o por la prueba de Biuret.

Los  aminoácidos están formados por un carbono-alfa el cual está conformado por un grupo amino, un grupo carboxilo, un hidrógeno y un grupo “R”, este último puede variar y es entonces cuando usamos pruebas cualitativas generales y específicas que permiten reconocer esos grupos químicos. A partir de la hidrólisis de proteínas se hace un análisis de los hidrolizados para poder indicar si los aminoácidos están presentes o ausentes, para esto se realizaron las siguientes pruebas en el laboratorio: prueba de Ninhidrina que identifica alfa-aminoácidos; prueba Xantoprotéica, identifica triptófano, tirosina y fenilalanina; prueba de Millón, identifica aminoácidos fenólicos; prueba de sulfuro, identifica Thioaminoácidos; y la prueba de bromo, que identifica el grupo Imidazol (como la Histidina).

Analizar los extractos proteicos de la semilla de soya ayuda a identificar su presencia, pero para identificar los aminoácidos en la muestra es necesario separar y a veces purificar la mezcla compleja de solutos solubles en un solvente común, esto se practicó en el laboratorio mediante la técnica de cromatografía por absorción en capa fina. La técnica de espectrofotometría se utilizó para cuantificar las proteínas extraídas de la muestra vegetal. En este análisis bioquímico se midió la absorción o emisión de energía radiante, al ser una prueba cuantitativa, se obtuvieron valores interpretados para graficar una curva de calibración de proteínas.

Las pruebas cualitativas y cuantitativas son de mucha importancia  primero para poder caracterizar las macromoléculas y reconocer las proteínas y también para determinar qué grupo o aminoácido contiene dicha proteína.

RESULTADOS

1. PREPARACION DE MUESTRAS VEGETALES PARA ANALISIS QUIMICO, SECADO, MOLIDO Y TAMIZADO DE MUESTRAS VEGETALES

Cantidad de semilla utilizada para preparar harina = 946g

Cantidad de harina obtenida = 792g

Pérdida en el proceso de preparación de harina = 154g

Se almaceno en un espacio frio para evitar el desarrollo de microorganismos que puedan afectar los valores de aminoácidos presentes.

1. EXTRACCION Y ESTUDIO CUALITATIVO DE PROTEINAS EN MUESTRAS VEGETALES

Cuadro 2. Pruebas de metales pesados para la caracterización de proteínas.

La prueba es positiva cuando la muestra analizada presenta un precipitado blanco ostentoso. Esta prueba se utiliza solo para identificar proteínas en la muestra analizada ya que es una prueba cualitativa

Cuadro 3. Prueba de Biuret con cuatro soluciones patrón y los dos extractos de proteína

1. ESTUDIO DE AMINOACIDOS DE MUESTRAS VEGETALES

Cuadro 4. Resumen de pruebas cualitativas

Cuadro 5. Resultados de las pruebas para las soluciones muestras hidrolizadas y desconocida

...