Aislamiento De DNA De Chícharo

AISLAMIENTO DE DNA DE CHÍCHARO, SU CARACTERIZACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA E HIDRÓLISIS DE ÁCIDOS NUCLEICOS E IDENTIFICACIÓN DE SUS COMPONENTES.

Introducción

El DNA es un polímero lineal largo, llamado ácido nucleico, que contiene información de tal forma que puede ser transmitida de una generación a la siguiente. Esta macromolécula está formada por un gran número de nucleótidos unidos, cada uno de ellos compuesto por un azúcar, un grupo fosfato y una base. La desoxirribosa es el azúcar del DNA, los cuales están unidos por puentes fosfodiéster, las bases del DNA son timina, citosina, guanidina y adenina.

Resultados de caracterización espectrofotométrica de DNA.

Longitud de onda Absorbancia nm Longitud de onda Absorbancia nm

200 0.07 250 0.454

205 0.053 255 1.215

210 0.086 260 1.642

215 0.097 265 1.584

220 0.101 270 1.524

225 0.097 275 1.297

230 0.164 280 1.019

235 0.121 285 0.708

240 0.160 290 0.458

245 0.206 295 0.262

300 0.142

Cálculos

Concentración

[DNA] = (Abs λ260nm)/22500 (F.D)= (1.642 nm)/22500 (15) = 1.0946 x 10-3 g/mL

Pureza

Pureza = (Abs λ260 nm)/(Abs λ280 nm) = (1.642 nm)/(1.019 nm) = 1.61

DISCUSIÓN

Mediante los resultados obtenidos se puede observar que la máxima absorbancia se encuentra en la longitud de onda de 260 nm. La concentración de DNA que se obtuvo fue de 1.0964 x10-3 g/mL, por otra parte el grado de pureza mediante la relación 260/280 nm fue de 1.61, sin embargo, los estándares son de 1.8 a 2 lo que nos indica que el DNA no fue del todo puro pero se acerca a los parámetros mencionados.

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